在ELISA实【shí】验中,血【xuè】清是【shì】极为常见的【de】样本,那么在ELISA实【shí】验过程中处【chù】理血清样本时有哪些注意事项【xiàng】呢【ne】?今天就跟大家来介【jiè】绍一下。
1、要注意避免出现严重溶血【xuè】。血红蛋【dàn】白中含有血红素【sù】基团【tuán】,其有类似过氧化物的【de】活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如【rú】血【xuè】清【qīng】样本【běn】中血红蛋白浓【nóng】度【dù】较高【gāo】,则【zé】其就很容易【yì】在温【wēn】育过程【chéng】中吸【xī】附于固相,从而【ér】与后面【miàn】加入的HRP底物反应显色。
2、样本的采集及血清分离【lí】中要注意尽【jìn】量避免【miǎn】细菌【jun1】污染,一则细菌的生【shēng】长,其【qí】所分泌的一些酶可能会【huì】对抗原抗体【tǐ】等蛋白产生分【fèn】解作用;二【èr】则【zé】一些细菌的内【nèi】源【yuán】性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会【huì】对用相应酶作标记【jì】的测定方【fāng】法产【chǎn】生非特异【yì】性【xìng】干扰。
3、血【xuè】清样本如是以无菌操作分离,则【zé】可以【yǐ】在2~8℃下保存一周【zhōu】,如为有菌操作【zuò】,则建【jiàn】议冰冻保【bǎo】存。样本的长时间保存【cún】,应在-70℃以下。
4、冰冻保【bǎo】存的血清样本须【xū】注意避免因【yīn】停电等造成【chéng】的反复【fù】冻融。样本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标【biāo】本中【zhōng】的【de】蛋白等分【fèn】子产生【shēng】破坏作用,从而引起【qǐ】假阴性结果。此【cǐ】外,冻【dòng】融【róng】样本的混匀亦应注意,不要进行【háng】剧烈振【zhèn】荡,反复颠倒混【hún】匀即可。
5、样本在【zài】保存中【zhōng】如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时【shí】,应离心沉淀【diàn】后取【qǔ】上【shàng】清检测。
以上就是【shì】ELISA实验【yàn】中【zhōng】处理血清样本的注意事项,处理好【hǎo】实验【yàn】样本是能【néng】顺【shùn】利【lì】进行实验的【de】前提,所以大家在一定【dìng】要多加注意。
我司所出售ELISA试剂盒价格公【gōng】道,质量【liàng】可【kě】靠放心有【yǒu】保障,提供【gòng】技术【shù】支持,提供售后保障,提供免费代测服务,提供试剂【jì】盒【hé】报价,使其【qí】灵敏度、准确性能【néng】有【yǒu】所提【tí】高。