moc1/moc2小鼠

moc1/moc2小鼠

细胞品系 : C57BL/6 Cxcr3-/-

细胞来源 : 国外

细胞鉴定 : STR鉴定已通过

细胞形态 : 淋巴母多角形细胞样,贴壁+悬浮生长

培 养 基 : DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML培养【yǎng】基【jī】：IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培养基+FBS10%(50ml）+2.5mg/500ml胰【yí】岛素+20ug/500ml+2.5ug/500ml EGF+ P/S  1% 双抗，1%。

培养条件 :  气相：空【kōng】气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度【dù】，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%

贴壁细胞

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。

2. 加入0.25％(w / v） EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化9-21分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时【shí】间），然【rán】后在【zài】显微【wēi】镜下观察细胞消化情【qíng】况，若细【xì】胞【bāo】大部【bù】分【fèn】

变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终【zhōng】止消化【huà】。

3. 轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心【xīn】3-5min，弃【qì】去上清液【yè】，补加1-2mL培养【yǎng】液后【hòu】吹匀。将细胞【bāo】悬【xuán】液【yè】按【àn】1：2的【de】比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的以保持细胞的

生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

4. 细【xì】胞冻【dòng】存: 收到细胞【bāo】后建【jiàn】议在培养【yǎng】前3代时冻存一【yī】批【pī】细胞种子以备后续实验使用。

5. 运输用的【de】培养基【jī】(灌液培【péi】养基)不能【néng】再【zài】用来培养【yǎng】细【xì】胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的来【lái】培养细【xì】胞。

细胞用途 : 仅供科研使用

注意事项

1. 建议加【jiā】入0.25%EDTA的去后充分混匀所有细胞都接触【chù】到【dào】，放置到培养【yǎng】箱【xiāng】进行消化【huà】，时【shí】长大约是9-21分钟左右【yòu】后拿出来

2. 在培养器皿的侧边【biān】进【jìn】行【háng】拍打帮【bāng】助细胞脱落，拍打过程大约持续2分钟左右才【cái】会【huì】脱落大【dà】部【bù】分细胞，如【rú】果脱落【luò】比【bǐ】例还不是很多，也可【kě】以重新放回【huí】培养【yǎng】箱【xiāng】继续消化9-21分钟后再【zài】次拿出来进行【háng】拍打脱落【luò】，等9-21%细胞都脱落后再终止消化，离心重悬再【zài】重新铺瓶【píng】，分散均匀。

3. MOC2细【xì】胞贴壁【bì】性和常规【guī】细【xì】胞类似【sì】没有特别牢固。倍【bèi】增周期【qī】也没有MOC1快。采用常规消化方【fāng】法处理。

常温发货

收【shōu】到后T25瓶消【xiāo】毒再放置培养箱静置【zhì】9-21小时后观察密度和状态拍照【zhào】9-21张反馈给销售，密度【dù】达标就可【kě】以传【chuán】代。前期传【chuán】代比例1:2，等【děng】再次长满后传【chuán】代时建议冻【dòng】存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另【lìng】外一瓶继续【xù】传代，反【fǎn】复冻存【cún】9-21只后才【cái】扩【kuò】增做实验，以防【fáng】突【tū】发情况引起断种。

干冰发货

常【cháng】规细胞发货冻【dòng】存管2只，复苏1只，另【lìng】外一【yī】只备用【yòng】，均没有复苏成功【gōng】的【de】情况即时留存复苏照片通知我【wǒ】们。

生物安全

1. 所有【yǒu】动物细胞均视为有潜在【zài】的生【shēng】物危害【hài】性，必须在二【èr】级生物安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有废液【yè】及【jí】接【jiē】触过此细胞的器皿需要灭【miè】菌【jun1】后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存【cún】细胞时始终使用防护【hù】手套、衣服【fú】和戴上【shàng】防护【hù】面罩。注意：冻存管浸【jìn】没在液【yè】氮【dàn】中会泄漏【lòu】，并会【huì】慢慢充满【mǎn】液氮。解冻时【shí】，液氮【dàn】转化成气相可【kě】能导致容器爆炸或用危【wēi】险【xiǎn】力吹掉其盖子，从而产生飞【fēi】扬【yáng】的碎【suì】屑造成人员伤害。

悬浮细胞

悬【xuán】浮状态下生长的细胞【bāo】，可【kě】以通过【guò】向培养【yǎng】瓶中添加培养基来维持细【xì】胞的生【shēng】长状【zhuàng】态，一般情况下细【xì】胞密度维持在

1×10⁵~1×10⁶个/mL

(不同细胞对密度要求【qiú】不同【tóng】）可以维持细【xì】胞【bāo】的正常生长。如需分瓶可以将【jiāng】细【xì】胞悬【xuán】液【yè】收集到离【lí】心管中1000rpm，离心5min，弃【qì】去上【shàng】清【qīng】，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞【bāo】悬液按1：2的比【bǐ】例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置【zhì】的新【xīn】的培养基以保持细胞的生长【zhǎng】活力，后【hòu】续【xù】传代根据【jù】实际【jì】情况按1:2~1:4的比例进【jìn】行。