目前市场上的ELISA试剂盒质量参差不齐，如【rú】何去挑【tiāo】选适合【hé】自己的试剂盒【hé】就显【xiǎn】得特别重要，主要参考【kǎo】以【yǐ】下四个因素：

一、检测方式
如今检测ELISA试剂盒有许多途径，我们可【kě】以根【gēn】据自己的偏好进【jìn】行选择。一般ELISA检【jiǎn】测的是酶促【cù】反【fǎn】应的可溶性产物，抗体上【shàng】结合有【yǒu】相应的酶，而反应体系中添加【jiā】有相应的底物。这种酶【méi】促【cù】反应具【jù】有特征性的颜色，可【kě】以通过【guò】分光光度计进行检测，碱性磷酸酶ap也【yě】是一【yī】种常用酶。酶可以结【jié】合在一【yī】抗上，也可【kě】以【yǐ】结合在二抗上，还可【kě】以【yǐ】使用【yòng】链霉【méi】亲【qīn】和素标【biāo】记的酶与亲和素【sù】标记的一抗结【jié】合。此外ELISA结果检测还包括放射性【xìng】检测、荧光检测、化学【xué】发【fā】光【guāng】或显色法检测等【děng】。

二、实验类型
虽然有多种类型，不过它们【men】都有一个共同特【tè】点，就是【shì】进行抗原捕获。一般捕获形【xíng】式包括将抗原吸附【fù】到微孔板【bǎn】或者用微孔板上的抗【kàng】体进行捕获。in-cell Elisa和酶联免疫斑点elispot是两【liǎng】种特殊的类型，in-cell Elisa需要将微孔板中培养的细胞进行固定和【hé】通透化【huà】，然后再【zài】用抗体原【yuán】位【wèi】检测【cè】。elispot有点【diǎn】像【xiàng】蛋白印【yìn】迹western blot，先在【zài】带膜的【de】微【wēi】孔板中培养细胞【bāo】，然【rán】后在膜上检测细胞【bāo】分【fèn】泌的【de】抗原形【xíng】成斑点【diǎn】。此【cǐ】外，我们还需【xū】要根据自身需要【yào】选择96孔【kǒng】板或是48孔板进行Elisa实【shí】验。

三、抗体类型
单克【kè】隆抗体和多克隆抗体【tǐ】都【dōu】能够用【yòng】于Elisa检测，实际上有时候【hòu】二者结【jié】合效果【guǒ】更好【hǎo】。例如【rú】，对于双抗夹心法【fǎ】而言，用多抗进行捕获而【ér】单抗【kàng】进行检测有时更有帮【bāng】助。多抗能够确保捕获所有抗原，随【suí】后单抗再【zài】特异性检【jiǎn】测拥有特定抗原表【biǎo】位的抗原。

四、交叉反应
如果抗体间发生【shēng】冲突或交叉反应就会【huì】影响整个【gè】实【shí】验的特异性。其中【zhōng】抗【kàng】体【tǐ】来源所带来的兼容性就是【shì】交叉反应的一【yī】个因素【sù】。尽管【guǎn】现【xiàn】在购买源自zhi定动物的抗体越来越容易【yì】，我【wǒ】们仍有【yǒu】必【bì】要【yào】确认一下【xià】是否【fǒu】会产生【shēng】交叉反应【yīng】的问题。在用双抗夹心【xīn】法进行Elisa检测时【shí】，检测用的二抗必须特异性针对检【jiǎn】测一抗，而【ér】不能【néng】与捕获抗体起反应。如果检测用【yòng】二抗与捕获【huò】抗【kàng】体结合，实验特异性【xìng】就会大【dà】打折扣。通【tōng】常我们选用源自不同宿主的捕获抗【kàng】体和检测【cè】一抗，来避免上述问题。

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