大家在养细胞的时候，想【xiǎng】必【bì】大家也一定【dìng】遇到过细胞状态【tài】差这种情况，但是细胞状【zhuàng】态差，有很多种原因造成。细胞状【zhuàng】态很差，常常出现的现【xiàn】象是【shì】：细胞边缘不清【qīng】晰【xī】、细胞不饱满、折光性差、背景比较脏、黑点很多【duō】、细胞碎片多（细【xì】胞凋亡后的细【xì】胞【bāo】碎片【piàn】）、单个细胞内有空泡【pào】（凋【diāo】亡）且空泡比较多【duō】；如果【guǒ】细【xì】胞【bāo】出现老【lǎo】化，也就是【shì】细胞比较扁平、增殖减缓【huǎn】、细胞核体积增大、细胞【bāo】突触变【biàn】多，此时观察到【dào】的细胞状【zhuàng】态也是不正常的【de】。所以，除了考虑血【xuè】清和细菌污【wū】染的问题，细胞老化【huà】也不容忽视~

细胞老化的征兆：

一、细胞周期阻滞

长【zhǎng】期【qī】的【de】细胞【bāo】周期阻滞是老化细胞的基本特征，也【yě】是体外鉴定细胞老【lǎo】化【huà】的指标。为了检查细胞是否跃出了细胞周【zhōu】期，人们通【tōng】常检【jiǎn】测增殖指【zhǐ】示分子Ki-67的表达丰度；或【huò】者通过将【jiāng】与胸腺嘧啶相似的【de】溴【xiù】脱氧尿【niào】mi啶（Bromodeoxyuridine，BrdU）掺入到细胞【bāo】培养基中，观察是否有新【xīn】的DNA合成【chéng】。细胞老化【huà】主【zhǔ】要表现为G1期阻滞，个【gè】别情况下【xià】也可伴随【suí】G2/M期周期阻滞【zhì】，或直接由【yóu】G2/M期阻滞诱发形成。

二、细胞形态改变

虽然由【yóu】于细胞周期的中断和DNA复【fù】制的停止，老化细胞【bāo】内【nèi】的DNA含量与正常【cháng】细胞【bāo】类似，但【dàn】 RNA与蛋白质【zhì】丰【fēng】度均比正常细胞要【yào】明显升高。这是因为【wéi】，尽管细胞进入老化阶【jiē】段后蛋白质的【de】整体合【hé】成速率降低，但【dàn】是蛋白质的降解体系【xì】受到更加【jiā】明显的抑制【zhì】，导致蛋白质在【zài】细胞【bāo】内持续堆积。但，由【yóu】于不同组【zǔ】织来源的【de】细胞，其形态本就各不相同，因此，目前还并【bìng】无【wú】客【kè】观【guān】的、统一的标准【zhǔn】从细【xì】胞【bāo】形态判【pàn】断并定义老化细【xì】胞。换句【jù】话【huà】说，目前并【bìng】不能直接根据细【xì】胞的形态去【qù】判断是否老化细胞。

总结：

研究表明,衰老细胞的细胞核、细胞质和细胞膜等均有明显的变化：

①细胞内水分减少,体积变小,新陈代谢速度减慢；

②细胞内酶的活性降低；

③细胞内的色素会积累；

④细【xì】胞【bāo】内呼吸速度减慢,细胞核体积【jī】增【zēng】大,核膜内折,染色质收缩【suō】,颜【yán】色加深.线粒体数量【liàng】减【jiǎn】少,体积增大；

⑤细胞膜通透性功能改变,使物质运输功能降低.

如何防止细胞老化：

1. 不要等细胞长得太满才传代【dài】。细胞【bāo】太密会导致细胞状【zhuàng】态下【xià】降【jiàng】，产生细胞接触性抑制【zhì】。

2. 细【xì】胞不要消【xiāo】化过度。采用医【yī】蛋白酶消化细胞，会造【zào】成细胞表【biǎo】面一定程【chéng】度的细胞【bāo】损伤。

3. 最【zuì】重要的是使用优质的血清和培养基：干细胞对培养基【jī】中的【de】内毒素非常【cháng】敏感【gǎn】。除了【le】要留意基【jī】础培养基的内毒素【sù】外，也要留意【yì】血清的内【nèi】毒素。如果血【xuè】清中内【nèi】毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易老【lǎo】化或死亡，导致细【xì】胞“亚健康"状态，导致实验受到影【yǐng】响。很多【duō】使用者，在血清【qīng】在试用【yòng】前，就【jiù】会通过提早审核该【gāi】批次《检测【cè】报告》，以决定【dìng】是否入围进【jìn】行试用【yòng】。

4. 在开始养【yǎng】细胞并传代时，也要特别注意冻存细【xì】胞，以保持细【xì】胞【bāo】有种子库存在【zài】，可以【yǐ】有效【xiào】避免细胞损伤。