小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

名  称： 小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

英　文： ESelectin ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期应用【yòng】：ELISA法定【dìng】量测定血【xuè】清、血浆、细胞培养上清或其它相【xiàng】关生物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用的板【bǎn】条应【yīng】立即放回包【bāo】装【zhuāng】袋【dài】中，密封【fēng】保存，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止液【yè】和底物A、B液时，避免【miǎn】使用带金属部【bù】分【fèn】的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品【pǐn】：标准品的【de】系【xì】列稀释【shì】应在实验时准备，不能储存【cún】，稀释前将标准品振荡混匀【yún】。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待【dài】测样品数量加上标准品的数量【liàng】决【jué】定所需的板条数，每个标准品【pǐn】和空白孔建议做复【fù】孔。

5)每个【gè】样品根据【jù】自己的【de】数量来【lái】定，能使用复孔的尽量做【zuò】复孔，标本用标本稀【xī】释【shì】液1:1稀释后加入50ul于【yú】反应孔内。

6)加入稀【xī】释【shì】好后的标准品50ul于反应【yīng】孔、加入待【dài】测样品50ul于反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去【qù】孔内液体，每孔【kǒng】加满洗涤液，振荡30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用吸水纸【zhǐ】拍干，重【chóng】复此操作3次【cì】。

9)每孔加入80ul的亲和链【liàn】酶素【sù】-HRP，轻轻【qīng】振【zhèn】荡混匀，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内【nèi】液体，每孔加满洗涤【dí】液【yè】，振荡30秒，甩去【qù】洗涤液，用吸水纸拍【pāi】干。重复【fù】此操作3次。

11)每孔加【jiā】入【rù】底【dǐ】物A、B各50ul，轻轻振荡混【hún】匀，37℃温育10分钟，避免光照。

12)取出酶【méi】标板，迅【xùn】速【sù】加【jiā】入50ul终止液，加【jiā】入终止液后应立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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