小鼠 PⅢNP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 PⅢNP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： PⅢNP ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期【qī】应用：ELISA法【fǎ】定量测定血清、血浆【jiāng】、细胞【bāo】培养【yǎng】上清或其它相关生物液【yè】体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不【bú】用的板条应立即放【fàng】回包装袋中【zhōng】，密【mì】封保存【cún】，以免变质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止【zhǐ】液和【hé】底物A、B液时，避免使用带金属部【bù】分的加样器【qì】。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准品的系列【liè】稀释应【yīng】在实验时【shí】准备，不能储存，稀【xī】释前将标准品【pǐn】振荡【dàng】混【hún】匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测【cè】样品数量加【jiā】上标准品的数量决定所【suǒ】需的板【bǎn】条数，每个【gè】标【biāo】准品和空白孔建议做【zuò】复孔。

5)每个【gè】样品根据自己的数量来【lái】定，能【néng】使用复孔的尽量【liàng】做复孔，标本用【yòng】标本稀释液【yè】1:1稀【xī】释后加入50ul于反应孔内。

6)加入稀释好后【hòu】的标准品【pǐn】50ul于【yú】反应孔、加入【rù】待【dài】测样品50ul于反应【yīng】孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内【nèi】液体，每【měi】孔加满洗涤液【yè】，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用吸水纸【zhǐ】拍干，重复此操作【zuò】3次【cì】。

9)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻【qīng】轻【qīng】振荡混【hún】匀，37℃温育30分钟【zhōng】。

10)甩去孔【kǒng】内液体，每孔加满洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去【qù】洗【xǐ】涤液【yè】，用吸水【shuǐ】纸拍干。重【chóng】复此操作3次。

11)每孔【kǒng】加【jiā】入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育10分钟，避免光照。

12)取【qǔ】出酶标板【bǎn】，迅速加入【rù】50ul终止液，加入终【zhōng】止液后应立即测定结【jié】果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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