小鼠 COL1 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称：小鼠 COL1 ELISA试剂盒 （酶联免疫检测法）

英　文： COL1 ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期【qī】应用：ELISA法定量测定血清【qīng】、血浆、细胞培【péi】养上【shàng】清或其它相关【guān】生物液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用的板条应【yīng】立即放【fàng】回包【bāo】装袋中【zhōng】，密封保存，以免【miǎn】变【biàn】质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止液【yè】和底物A、B液时，避免使用带金【jīn】属部【bù】分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准品【pǐn】的系列稀释应在实【shí】验时【shí】准备【bèi】，不能储存【cún】，稀释前【qián】将标准品振荡混【hún】匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待【dài】测样品数【shù】量加上标【biāo】准品的数【shù】量决【jué】定所需的板条数，每个【gè】标准品和空【kōng】白孔建议做复【fù】孔。

5)每个样【yàng】品根据自己的数量来【lái】定【dìng】，能使【shǐ】用复【fù】孔的尽量【liàng】做复孔，标本用标本稀【xī】释【shì】液1:1稀释后加入50ul于反【fǎn】应孔内。

6)加入稀释好后的标准品50ul于【yú】反应【yīng】孔、加入【rù】待测样【yàng】品【pǐn】50ul于反应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每【měi】孔加满洗涤液，振【zhèn】荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液【yè】，用吸水纸【zhǐ】拍【pāi】干，重【chóng】复此操作【zuò】3次。

9)每孔加入80ul的【de】亲和链【liàn】酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温【wēn】育30分钟。

10)甩【shuǎi】去孔内液【yè】体【tǐ】，每孔【kǒng】加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用【yòng】吸水纸拍【pāi】干。重复此操作3次【cì】。

11)每孔加入底物A、B各50ul，轻【qīng】轻振荡混【hún】匀【yún】，37℃温【wēn】育10分钟，避免光照。

12)取出【chū】酶标板，迅【xùn】速加入50ul终止液，加【jiā】入终止液【yè】后应立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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