小鼠足细胞（MPC-5）

小鼠足细胞(MPC-5)
细胞特性
1)来源：小鼠
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运【yùn】输和保存：使用【yòng】含有胎【tāi】牛血清的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收【shōu】到细胞后，可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃去上清，加入推【tuī】荐 使【shǐ】用的培养基【jī】后【hòu】转移至【zhì】l〇cm培养皿【mǐn】或【huò】者T25培养瓶中培【péi】养，传代达到细胞生长状【zhuàng】态良好时【shí】，再进行冻存。具体操【cāo】作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠足细胞(MPC-5)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖2.5g八，丙【bǐng】酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2.培养条件：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱 湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储【chǔ】存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃【huǎng】解冻【dòng】，加【jiā】入4mL培养【yǎng】基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清【qīng】液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀【yún】。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检【jiǎn】 查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培
养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后在显微【wēi】镜下【xià】观察细胞消化情况，若【ruò】细胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅【xùn】速拿【ná】回操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加少量培养【yǎng】基终止消【xiāo】化。
按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀。
将细【xì】胞悬【xuán】液按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿【mǐn】中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁【bì】细胞【bāo】冻存时，弃去【qù】培养基【jī】后【hòu】加入【rù】少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱【tuō】落后，加【jiā】入约lml含血清【qīng】的培养基后加【jiā】入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
小鼠足细胞(MPC-5)注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发【fā】现干冰【bīng】己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞均视为有【yǒu】潜在的【de】生物【wù】危害【hài】性，必须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所【suǒ】有【yǒu】废液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌【jun1】后【hòu】方能丢弃。