小鼠肾小球系膜细胞（SV40-MES-13）

小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)
细胞介绍
该细胞系来源于转染SV40的转基因小鼠的肾脏。
 
细胞特性
1)来源：肾小球，小鼠
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在【zài】显微镜下确认细【xì】胞生长状态，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶【píng】置【zhì】于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞【bāo】长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞【bāo】传【chuán】代，传代培养用6ml本公司附带的【de】*培养【yǎng】基。
5.接到细胞次【cì】日【rì】，请检查细胞是否污染，若发【fā】现污染或疑【yí】似污染【rǎn】，请及【jí】时【shí】与我们取得电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备培【péi】养【yǎng】基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium(CatalogNo_30-2002): Ham'sF12mediumwith14mMHEPES=3:l，即【jí】三份的DMEM，1份 Ham'sF12
混合培养基)，85%;胎牛血清，5%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞【bāo】悬液的冻存管迅速放【fàng】入37°C水浴中（水面要低【dī】 于冻存【cún】管【guǎn】盖部）摇晃解冻，移入【rù】事先准备好【hǎo】的【de】含【hán】有4mL培养【yǎng】基的【de】15ml离心 管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培 养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基【jī】的培【péi】养【yǎng】瓶中培【péi】养过夜【yè】。 第二天换液并检查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力【lì】口【kǒu】2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培
养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后在显微镜下观【guān】察细胞消【xiāo】化情况【kuàng】，若细胞大部分变【biàn】圆并【bìng】脱【tuō】落，迅速【sù】拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后【hòu】加入【rù】3ml此【cǐ】细【xì】胞的培养基终止消化。
轻轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离心管中，在1000RPM条【tiáo】件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液，加【jiā】入【rù】lmL培养液后吹匀。
移入【rù】到事【shì】先准【zhǔn】备好的含有5ml培养基的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基的T-75培养【yǎng】瓶【píng】中培养。
 
细胞冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长【zhǎng】状态良好时【shí】，可【kě】进行细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要消化处理并进行细胞计【jì】数。消化【huà】方法按【àn】照细胞【bāo】传代方法的9-21步骤进行， 后的重悬液使【shǐ】用【yòng】血清。悬浮【fú】细胞直接计数后离【lí】心，用血清【qīng】重悬浮，加DMSO至终浓度【dù】为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到【dào】冻【dòng】存【cún】管【guǎn】 中。本公司按每个冻存管细胞数目大【dà】于【yú】1X106个细胞冻【dòng】存。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损【sǔn】及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均【jun1】视为有【yǒu】潜在【zài】的【de】生物危害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请注意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的【de】器【qì】皿需【xū】要灭【miè】菌后方能丢弃。