小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）

小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）
细胞介绍
这【zhè】株细胞来源于转基因小鼠中生长的一个胰腺肿瘤【liú】(胰岛素瘤)。这种【zhǒng】小鼠【shǔ】携【xié】带了大鼠胰岛素II基【jī】因启动子调控的【de】SV40早期基因的假基因【yīn】结构。细【xì】胞包【bāo】含丰富的胰岛素和小量的胰高【gāo】血糖素【sù】及【jí】生长抑素。响应葡萄糖而【ér】分【fèn】泌【mì】胰岛素[PubMed:7533732]
 
细胞特性
1)来源：胰岛素瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显【xiǎn】微镜下确认细胞生【shēng】长【zhǎng】状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培【péi】养【yǎng】约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长【zhǎng】满【mǎn】（90%以上）请及时进行细胞【bāo】传代【dài】，传代培养用6ml本公【gōng】司附带的*培【péi】养【yǎng】基。
5.接到细胞次日，请检查细【xì】胞是否污染【rǎn】，若发现污染或疑【yí】似污染【rǎn】，请【qǐng】及【jí】时与【yǔ】我们取得【dé】电联。
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培【péi】养【yǎng】箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管迅【xùn】速放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水【shuǐ】面要低【dī】于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事【shì】先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管【guǎn】中【zhōng】混合【hé】均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培
养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养【yǎng】瓶中培养【yǎng】过夜【yè】。
 
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。对【duì】于【yú】贴壁细【xì】胞【bāo】，传代可参考以下【xià】方法：弃【qì】去培养【yǎng】上清，用不【bú】含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力口【kǒu】 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消【xiāo】化9-21分【fèn】钟，然后【hòu】在显微镜下观【guān】察细【xì】胞消化情况，若细胞大部分【fèn】变圆并脱落，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几【jǐ】下【xià】培养瓶后【hòu】加入【rù】3ml此细胞的【de】培【péi】养【yǎng】基终止【zhǐ】消【xiāo】化【huà】。轻【qīng】轻吹打【dǎ】后吸出，移【yí】入15ml离心【xīn】管【guǎn】中，在1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养液后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养【yǎng】基的T-25培养瓶中或含有14ml培养的T-75培养瓶中培养【yǎng】。
 
细胞冻存：
待【dài】细【xì】胞【bāo】生【shēng】长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻【dòng】存时，先要消【xiāo】化【huà】处【chù】理【lǐ】并进行【háng】细【xì】胞计【jì】数。消【xiāo】化方法按照【zhào】细胞传代方法的9-21步骤进行，后的重悬【xuán】液使用血清。悬【xuán】浮【fú】细胞直接计数【shù】后离心，用血清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每【měi】lml的数量分配到冻存管【guǎn】中。本公司按每【měi】个冻存管细胞数目大于1X106个细胞【bāo】冻存。 
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污【wū】染，请【qǐng】立即与我们电【diàn】联【lián】。
所【suǒ】有动【dòng】物细胞均视为有潜【qián】在的生【shēng】物危害性，必【bì】须在二级【jí】生物安全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接【jiē】触【chù】过此细胞的器皿【mǐn】需要灭【miè】菌后方能丢弃。