绒猴EBV转化的白细胞（B95-8）

绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)
细胞介绍
B95-8细胞株源自暴【bào】露于人白【bái】血球中抽提的EB病毒的【de】绒猴白血球。B95-8是【shì】一个连续株并【bìng】释放高滴度的转染EB病毒。此【cǐ】细胞株【zhū】提供EB病毒用【yòng】于建立【lì】人的【de】连续淋巴【bā】细胞株【zhū】。
 
细胞特性
1)来源：外周血淋巴细胞
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口【kǒu】膜【mó】并将T25瓶【píng】置于【yú】37°C培养2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长【zhǎng】满（90%以上）请及时【shí】进行细胞【bāo】传代，传代培养用6ml本公司【sī】附带的【de】*培养【yǎng】基。
5.接到细胞次【cì】日，请检查细胞是【shì】否【fǒu】污染，若发现污染【rǎn】或疑似污【wū】染，请及时与我们【men】取得电联【lián】。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640: GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
培【péi】养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱湿度为 70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的【de】冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于【yú】冻存管盖部）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培【péi】养【yǎng】基的15ml离心管中混合【hé】均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去【qù】上清液，加入lmL培【péi】
养基后吹匀。然后将【jiāng】所有【yǒu】细【xì】胞悬液【yè】移入含有5ml培养基的培【péi】养【yǎng】瓶中培养过【guò】夜【yè】。第二天换液并检【jiǎn】查细【xì】胞密度【dù】。细胞传【chuán】代：如果细胞密度达80%-90%，即可进【jìn】行传代培养。对于【yú】悬浮【fú】细胞，传代可参考以下方法：
方法一【yī】：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后【hòu】吹句，将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的【de】比【bǐ】例分到新的含8ml培养基【jī】的新【xīn】皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。
方【fāng】法二【èr】：可【kě】选择【zé】半数换液方式，弃去【qù】半数培养【yǎng】基后【hòu】，将剩余细【xì】胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的【de】比例分到新的【de】含【hán】8ml培养基的新皿【mǐn】中【zhōng】或者瓶中。细胞冻【dòng】存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮【fú】细胞冻存时，应【yīng】将收【shōu】集，1000RPM，常温条件下离心5分【fèn】钟，少量【liàng】保【bǎo】存【cún】上清液（防【fáng】止细胞吸走)，加入部分新鲜【xiān】培养基，吹【chuī】打【dǎ】均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中【zhōng】加入10%DMSO摇匀【yún】后【hòu】进行冻存。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破【pò】损【sǔn】及细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜【qián】在的生物危害性，必须在二级生物【wù】安【ān】全台内【nèi】操作，并请注意【yì】防护，所有废液及接触【chù】过【guò】此细胞【bāo】的【de】器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。