仓鼠肺细胞（CHL）

仓鼠肺细胞（CHL)
细胞介绍
该细胞广泛应用于染色体异常测试。。
 
细胞特性
1)来源：中国仓鼠肺
2)形态：成纤维细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻【dòng】存管包装运【yùn】输和保存：可选【xuǎn】择干【gàn】冰运输及发送复苏存活细胞【bāo】方式：（1)干冰运输，收到后立【lì】即转入液【yè】氮冻【dòng】存或【huò】直接复苏；（2)存活细胞，收到后【hòu】应继续生长，传代达【dá】到【dào】细胞生长状态【tài】良【liáng】好时，再进【jìn】行【háng】冻存。具体操作见细胞培养步骤。
 
仓鼠肺细胞（CHL)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八【bā】,D-葡萄糖【táng】2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。或者：DMEM培养基(GIBCO,添加NaHC031.5g八)，90%;胎牛【niú】血清，10%。
2. 培【péi】养条件【jiàn】：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度【dù】，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配【pèi】。液【yè】氮储存。
  
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬【xuán】液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养【yǎng】基【jī】混合【hé】均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有细【xì】胞【bāo】悬液【yè】加入【rù】培养【yǎng】瓶中培养过夜（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液【yè】并检查细胞密度。细胞传代：如【rú】果【guǒ】细【xì】胞密度达80%-90%，即可进行传代培【péi】养。对于贴【tiē】壁细胞【bāo】，传代可【kě】参考以下方法：弃去【qù】培【péi】养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养【yǎng】瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞【bāo】消化情【qíng】况若细胞【bāo】大部变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少【shǎo】量培养基【jī】终止按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀【yún】。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的【de】新皿中或者瓶中。
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态【tài】良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，弃去培养基后加【jiā】入少量胰【yí】酶，细胞【bāo】变【biàn】圆脱【tuō】落【luò】后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后【hòu】进【jìn】行【háng】冻存。
 
仓鼠肺细胞（CHL)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥发【fā】干净、冻存【cún】管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请【qǐng】即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞【bāo】均视为有潜在的生物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所【suǒ】有废液【yè】及接触过【guò】此细胞的器皿【mǐn】需要灭【miè】菌后方【fāng】能丢弃。