大鼠 GP-II ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 GP-II ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前将各种试【shì】剂【jì】取出放置30分钟，平【píng】衡至室温，所【suǒ】有标准品和样品必需设【shè】置平行对照【zhào】实验，快速加入试剂至【zhì】样【yàng】品【pǐn】中【zhōng】，立即漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依【yī】据实验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用量，将剩余【yú】的【de】酶标条连同【tóng】干燥剂一【yī】起放回密封塑料袋【dài】，密【mì】封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结【jié】合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液【yè】至【zhì】各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结【jié】合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔【kǒng】置于孔板振动【dòng】器【qì】上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小【xiǎo】时。

10. 在【zài】吸水纸上拍干微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗【xǐ】3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各【gè】微孔【kǒng】，在干【gàn】净【jìng】的无尘吸【xī】水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以【yǐ】确保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底【dǐ】物溶【róng】液【yè】，于室温【wēn】静置5~30分【fèn】钟。（显色底物【wù】A和B需在临【lín】用前15分钟内等体积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空【kōng】白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除【chú】每个读【dú】数的Blank（空白）孔光密度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使用【yòng】试剂【jì】盒时，应将各种【zhǒng】试剂管离【lí】心数分钟，以便【biàn】试剂集中【zhōng】到【dào】管底。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任【rèn】何【hé】试剂，只是zui后【hòu】加底【dǐ】物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防止【zhǐ】样品【pǐn】蒸发，试验时将反应板放【fàng】于【yú】铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖【gài】或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的【de】酶标板或者试剂，请于9-22℃保【bǎo】存，标准品、生【shēng】物-素标【biāo】记抗【kàng】体工【gōng】作液【yè】、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素【sù】工作液请依据所【suǒ】需的量【liàng】配置使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释过【guò】的标准品、生物-素【sù】标记抗【kàng】体工作液【yè】或、辣根过【guò】氧化物酶标记亲和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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