大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂取出放置30分【fèn】钟，平衡至室温【wēn】，所有标【biāo】准【zhǔn】品和样【yàng】品必需设置平行对照实验，快速【sù】加入试剂至【zhì】样【yàng】品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用【yòng】量，将剩余的酶标条【tiáo】连同干燥剂一起放【fàng】回【huí】密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个【gè】微孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各【gè】孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置于【yú】孔板振动【dòng】器上【shàng】，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在【zài】吸【xī】水纸上拍【pāi】干微孔【kǒng】内溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗【xǐ】涤，清空各微孔，在【zài】干净的【de】无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数【shù】次，以确【què】保【bǎo】没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶【róng】液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在【zài】临用前15分钟内等体积【jī】混合，并避光放【fàng】置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那【nà】么手【shǒu】动【dòng】扣除每个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在【zài】初次使【shǐ】用试剂盒【hé】时，应将【jiāng】各种试剂管【guǎn】离心数分钟，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验【yàn】留一孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任【rèn】何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至零【líng】。

3. 为防止【zhǐ】样【yàng】品蒸发，试验时将【jiāng】反应板放【fàng】于铺有湿布的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或【huò】覆【fù】膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标【biāo】记抗体工作液、辣根【gēn】过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液请依【yī】据所需【xū】的【de】量配置【zhì】使用，请勿【wù】重【chóng】复【fù】使【shǐ】用已稀释【shì】过的标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣【là】根过【guò】氧【yǎng】化【huà】物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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