产品时间:2024-9-21
大鼠 AR ELISA试【shì】剂【jì】盒(酶联免疫检测法)由上海【hǎi】酶联生【shēng】物提【tí】供,包括AR ELISA试剂盒说明书,酶联免【miǎn】疫检测试剂盒免费代测等产品详【xiáng】细【xì】介绍。
中文名称:大鼠 AR ELISA试剂盒(酶联免疫检测法)
产品规格:48T/96
产品存储:低温、避光保存
产品库存:现货供应
产品分类:酶联免疫试剂盒
产品用途:仅供检测,不得用于临床
发货方式:专门快递免费送货上门
实验步骤:
使用前【qián】将各种试剂取【qǔ】出放置30分钟,平衡至【zhì】室温【wēn】,所有【yǒu】标【biāo】准品和样品必【bì】需设置平行对照实验,快速【sù】加【jiā】入试剂至样品中,立【lì】即【jí】漩涡震荡2秒混匀。
1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量,将剩余的酶标条【tiáo】连【lián】同干燥剂一起【qǐ】放回密【mì】封塑料【liào】袋,密封,4℃保存。
2. 移取50μL中和【hé】液至各【gè】个微孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白【bái】)孔。
3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔(0 pmol/mL cAMP标准品)。
4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。
5. 移取100μL样品至相应的孔。
6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合)孔。
7. 移【yí】取50μL 偶联【lián】酶【méi】至各【gè】孔中,除了TA(全活性)孔和【hé】Blank(空白)孔。
8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各【gè】孔【kǒng】中,除了TA(全【quán】活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非【fēi】特异【yì】结合【hé】)孔。
9. 将酶【méi】标孔置于孔板【bǎn】振动器【qì】上,250~500rpm,室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。
10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶液,加【jiā】洗【xǐ】涤液400μL每孔洗3次,每次需拍干【gàn】。
11. 后一次洗涤【dí】,清空各【gè】微孔,在干【gàn】净的无尘吸水纸上轻巧酶标【biāo】板数【shù】次,以【yǐ】确【què】保没有洗涤液残留。
12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。
13. 每【měi】孔200μL显【xiǎn】色底物溶液,于室温静置5~30分钟【zhōng】。(显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分钟【zhōng】内等体积混合,并【bìng】避光放置)。
14. 每孔加入50μL终止液,终止后立即读数。
15. 清除酶标仪Blank(空【kōng】白)孔值,读取450nm处的光密【mì】度值,在570nm至590nm之【zhī】间好有修正,如果酶【méi】标【biāo】仪【yí】不【bú】能自动清除Blank(空白)孔值,那么手动【dòng】扣除每【měi】个读数的【de】Blank(空白【bái】)孔光密度值。
注意事项:
1. 用户【hù】在【zài】初次【cì】使用试剂盒时,应将各种试剂管离心【xīn】数分钟,以【yǐ】便【biàn】试剂集【jí】中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白【bái】调零孔,该孔不【bú】加任何试剂,只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4,测量时先用【yòng】此【cǐ】孔调【diào】OD值至【zhì】零【líng】。
3. 为防止【zhǐ】样品【pǐn】蒸发,试验时将反应板【bǎn】放于铺有湿布【bù】的密闭【bì】盒内,酶【méi】标板加上盖【gài】或覆膜。
4. 未使用完的酶标板【bǎn】或【huò】者试剂,请于9-21℃保【bǎo】存,标准品、生物-素标记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液【yè】请【qǐng】依据所需的量配置使【shǐ】用,请【qǐng】勿重【chóng】复使用【yòng】已【yǐ】稀【xī】释过的【de】标【biāo】准品、生物【wù】-素标【biāo】记抗体工作【zuò】液或、辣【là】根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
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