大鼠BMPR1A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 BMPR1A ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将【jiāng】各种【zhǒng】试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至室【shì】温，所【suǒ】有标准品和样品必需设置平行对照【zhào】实验，快速【sù】加入【rù】试剂【jì】至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验【yàn】键【jiàn】盘纸决定酶标【biāo】条的使【shǐ】用量，将剩余的酶【méi】标条连同干【gàn】燥剂一起放【fàng】回密封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶【méi】至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液【yè】至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小【xiǎo】时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干【gàn】微【wēi】孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干净的【de】无尘吸水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标板数次，以【yǐ】确保【bǎo】没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分【fèn】钟。（显色底【dǐ】物A和B需在【zài】临用前15分钟内【nèi】等体【tǐ】积混合，并避【bì】光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔【kǒng】值【zhí】，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶【méi】标仪【yí】不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白）孔【kǒng】光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次【cì】使用试剂盒时，应将【jiāng】各种【zhǒng】试剂管离心【xīn】数分钟，以【yǐ】便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一【yī】孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不【bú】加任【rèn】何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此【cǐ】孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发【fā】，试验时将反应【yīng】板【bǎn】放于【yú】铺有湿【shī】布的密闭盒【hé】内，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标板或者试剂，请于【yú】9-21℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶【méi】标记亲和素工作【zuò】液请依据【jù】所需【xū】的量配置【zhì】使用，请勿重复使【shǐ】用已稀【xī】释过的标准品、生物-素标【biāo】记抗【kàng】体工作液或【huò】、辣根过氧化物酶【méi】标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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