大鼠IL1sRⅠELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IL-1sRⅠELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取【qǔ】出放置30分【fèn】钟，平【píng】衡至室温，所【suǒ】有标准品【pǐn】和样品必【bì】需设置平【píng】行对【duì】照实验，快速【sù】加入试剂至样【yàng】品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘【pán】纸决【jué】定【dìng】酶标条的【de】使【shǐ】用量，将剩余的酶标条连【lián】同干【gàn】燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋【dài】，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至【zhì】各个【gè】微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结【jié】合【hé】）孔。

7. 移【yí】取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特【tè】异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在【zài】吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每【měi】次需【xū】拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的无尘【chén】吸【xī】水纸上【shàng】轻巧酶标板数【shù】次，以确保【bǎo】没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需在【zài】临用前15分钟【zhōng】内等体积混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有【yǒu】修正，如果酶【méi】标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每【měi】个读数【shù】的Blank（空白）孔【kǒng】光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时【shí】，应将各【gè】种试剂管离心【xīn】数【shù】分钟【zhōng】，以便试剂集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验【yàn】留【liú】一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试【shì】剂，只是zui后加【jiā】底物溶【róng】液【yè】及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品【pǐn】蒸发【fā】，试验时【shí】将反【fǎn】应板放于铺有湿布的【de】密【mì】闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使【shǐ】用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存，标准品【pǐn】、生物-素【sù】标记【jì】抗体工作液、辣根【gēn】过【guò】氧化物酶标记【jì】亲【qīn】和【hé】素工作液请依据所需的量配置使用，请勿【wù】重【chóng】复使用已【yǐ】稀释过的标【biāo】准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液或、辣根过氧化【huà】物【wù】酶标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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