大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 Cr ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用前【qián】将各种【zhǒng】试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品【pǐn】必需设置平行对照实【shí】验，快速【sù】加入【rù】试剂【jì】至样品中，立【lì】即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶标【biāo】条的【de】使用量，将剩余的【de】酶标条连同干燥剂一起【qǐ】放回【huí】密封塑料袋，密【mì】封【fēng】，4℃保存。

2. 移取50μL中和液至各【gè】个微孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联【lián】酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和【hé】Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工作液至各【gè】孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标【biāo】孔置于孔板振【zhèn】动器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小时。

10. 在吸水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需【xū】拍干。

11. 后一次洗涤【dí】，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶【méi】标板数次，以确保【bǎo】没【méi】有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于室温【wēn】静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物【wù】A和B需【xū】在临用前15分【fèn】钟内等体积混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白【bái】）孔值【zhí】，读取450nm处的光密【mì】度【dù】值，在570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶【méi】标仪【yí】不能自动清除【chú】Blank(空白【bái】)孔值，那么手动扣除【chú】每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将【jiāng】各种试剂【jì】管离心【xīn】数分钟【zhōng】，以便【biàn】试【shì】剂集中到管【guǎn】底。

2. 每次实验留【liú】一孔作为空白调零孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶液及2N H2SO4，测【cè】量时先用此【cǐ】孔调OD值【zhí】至零【líng】。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发【fā】，试【shì】验【yàn】时将反应板放【fàng】于铺有湿布的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的【de】酶【méi】标板或【huò】者【zhě】试剂，请【qǐng】于9-22℃保存，标准品、生物【wù】-素标记抗体【tǐ】工作液【yè】、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记【jì】亲和素工作液请依据所需的量【liàng】配置使用，请【qǐng】勿重复使用【yòng】已稀释【shì】过的标【biāo】准品、生物【wù】-素标记抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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