大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 PY ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置30分【fèn】钟，平衡至室温，所有【yǒu】标准品和样品必【bì】需设置【zhì】平行【háng】对【duì】照实验，快速加入试【shì】剂至样【yàng】品中，立即漩涡震荡【dàng】2秒混匀【yún】。

1. 依据实验【yàn】键【jiàn】盘纸决定酶标条的使用量，将剩【shèng】余的【de】酶标条连同干【gàn】燥【zào】剂一起放【fàng】回密【mì】封塑料袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中和液【yè】至各【gè】个微孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异【yì】结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异【yì】结合【hé】）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置于孔板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵【fū】育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清【qīng】空各微孔【kǒng】，在干净的无尘吸水纸上轻巧【qiǎo】酶标板数次，以【yǐ】确保没有洗涤【dí】液残【cán】留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内【nèi】等体【tǐ】积混合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除【chú】酶标仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取【qǔ】450nm处【chù】的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个读【dú】数的【de】Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户【hù】在初次使用【yòng】试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便【biàn】试剂集中到【dào】管【guǎn】底【dǐ】。

2. 每次实【shí】验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔不加【jiā】任何试剂【jì】，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至【zhì】零。

3. 为【wéi】防【fáng】止样品蒸发，试验时将反应【yīng】板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加【jiā】上盖【gài】或覆【fù】膜。

4. 未使用【yòng】完的【de】酶【méi】标板或者试剂，请【qǐng】于【yú】9-22℃保存，标【biāo】准品、生物-素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记【jì】亲和素工作液请依【yī】据【jù】所需的【de】量【liàng】配【pèi】置使用，请勿重【chóng】复【fù】使用【yòng】已稀释过的标准品、生物-素【sù】标【biāo】记抗体工作液或、辣【là】根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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