大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂取出放置30分钟，平衡至室温，所【suǒ】有标准品和【hé】样品必【bì】需【xū】设置【zhì】平行对【duì】照实验【yàn】，快速加入试【shì】剂【jì】至样品中，立即【jí】漩涡震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使【shǐ】用量【liàng】，将剩余的酶标条连同干【gàn】燥剂一起放回【huí】密封塑料袋，密【mì】封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至各个微孔中，除【chú】了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔【kǒng】。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合【hé】)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特【tè】异【yì】结合）孔【kǒng】。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】、Blank（空白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置【zhì】于孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室【shì】温孵育2小时。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干【gàn】微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍【pāi】干。

11. 后一【yī】次洗涤，清空各微孔，在【zài】干【gàn】净的无【wú】尘吸水纸上【shàng】轻巧酶标【biāo】板数次，以确保没有洗【xǐ】涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于【yú】室温静【jìng】置【zhì】5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积【jī】混合，并【bìng】避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔【kǒng】值，读【dú】取450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果酶标仪不能【néng】自动清除Blank(空白)孔值，那【nà】么手动【dòng】扣除每个读数【shù】的Blank（空【kōng】白）孔光密【mì】度【dù】值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用试剂【jì】盒时，应【yīng】将各种试剂管离心数【shù】分钟，以便试剂集中到【dào】管底【dǐ】。

2. 每【měi】次【cì】实验留一孔作为空白调零孔，该【gāi】孔不加任何试剂，只是zui后加底物溶液【yè】及【jí】2N H2SO4，测量【liàng】时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试【shì】验时【shí】将【jiāng】反【fǎn】应板放于铺有湿布【bù】的密闭【bì】盒内，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试【shì】剂，请于9-21℃保存，标准品、生物-素标【biāo】记【jì】抗体【tǐ】工【gōng】作【zuò】液、辣根过氧化物【wù】酶标记亲和素工作液【yè】请【qǐng】依据所需【xū】的量配置使用【yòng】，请勿重复【fù】使用已稀释过【guò】的【de】标准品、生物-素标记抗体【tǐ】工作液【yè】或、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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