绵羊肺细胞（OAR-L1）

绵羊肺细胞(OAR-L1)
细胞介绍：
该细胞系【xì】来源【yuán】于一雌性绵【mián】羊的肺组【zǔ】织。1990年【nián】由中国科学院【yuàn】昆明细胞库建立。
 
细胞特性
1)来源：绵羊肺
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下确认细胞生长状态【tài】，去掉封【fēng】口【kǒu】膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满【mǎn】（90%以上）请及时进【jìn】行细胞【bāo】传代，传代培养【yǎng】用6ml本公司附【fù】带的*培养【yǎng】基。
5.接到【dào】细【xì】胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若发现【xiàn】污染或【huò】疑似污染，请【qǐng】及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。

绵羊肺细胞(OAR-L1)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 McCOY's 5A 培养基(McCOY's 5A，GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养箱湿【shī】度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】迅速放入37°C水浴中（水面要低【dī】于冻存【cún】管盖部）摇晃解【jiě】冻，移入【rù】事先准备好【hǎo】的含有4mL培养基的15ml离【lí】心管【guǎn】中混【hún】合【hé】均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，加入lmL培
养基后吹【chuī】匀。然【rán】后将所有【yǒu】细胞悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养瓶中培养【yǎng】过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次【cì】。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中【zhōng】消化9-21分【fèn】钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消化情况，若细胞大【dà】部【bù】
分变圆并脱【tuō】落【luò】，迅速拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加入3ml此细【xì】胞的培养基【jī】终止消化。轻轻吹【chuī】打后吸出，移入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃【qì】去【qù】上清液，加入lmL培养【yǎng】液后【hòu】吹匀。
移入到事先准备好【hǎo】的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或【huò】含有14ml培【péi】养基的T-75培【péi】养瓶中培【péi】养。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状【zhuàng】态良【liáng】好时，可【kě】进【jìn】行细【xì】胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化【huà】方法【fǎ】按【àn】照细胞传代方法的9-21步骤进行，后的重悬液【yè】使用血清。悬【xuán】浮【fú】细胞直接计数【shù】后离心，用血清重悬浮，加【jiā】DMSO
至终【zhōng】浓度为10%。加【jiā】入DMSO后迅速混【hún】匀，按每lml的数量分配【pèi】到冻存管【guǎn】中。本公司按【àn】每个冻【dòng】存管细胞数目大于【yú】1X106个细胞冻【dòng】存。
 
绵羊肺细胞(OAR-L1)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干【gàn】净、冻存管瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有【yǒu】污染，请立即【jí】与我【wǒ】们电【diàn】联。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜在【zài】的【de】生物危害性，必须在二级生物安全【quán】台内操【cāo】作【zuò】，并请注意【yì】防护，所有废液及接触【chù】过【guò】此细胞的器【qì】皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。