人胰腺癌细胞（Capan-1）

人胰腺癌细胞(Capan-1)
细胞介绍：
该细胞来源【yuán】于一位40岁【suì】白【bái】人男性患者的【de】肝转移【yí】。细胞表达粘液素，Rh+，HLA A2,，A9，B13，B17。含【hán】有刺激素受体【tǐ】和【hé】乙二醇激素受体。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备IMDM培【péi】养基（IMDM，GIBCO，80%;北【běi】美胎牛血 清(United States，GIBCO，货【huò】号16000-044)，20%。
2.培养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度【dù】 为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴【yù】中（水面要低 于冻存管【guǎn】盖部）摇晃解冻【dòng】，移【yí】入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下【xià】离【lí】心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，加【jiā】入lmL培 养基后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬【xuán】液移入含有【yǒu】5ml培养基的培【péi】养瓶中培【péi】养过夜。第二天【tiān】换液并检查细【xì】胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-21次。力【lì】口2m丨【shù】消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下【xià】观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部 分变圆并脱落，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲【qiāo】几下培【péi】养瓶后加入3ml此细胞【bāo】的 培养【yǎng】基终【zhōng】止消化。轻轻吹【chuī】打后吸出【chū】，移【yí】入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟， 弃【qì】去上清液，加入lmL培养【yǎng】液后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培【péi】养基【jī】的T-75培【péi】养瓶【píng】中【zhōng】培养【yǎng】。
 
3)细胞冻【dòng】存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存时，先要消化处理【lǐ】并进行细胞【bāo】计数。消化方法按【àn】照细胞传代方法的9-21步【bù】骤进行，后【hòu】的重悬液使用血清。悬浮【fú】细胞直接计数【shù】后【hòu】离心，用【yòng】血清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度为【wéi】10%。加入DMSO后【hòu】迅速混匀，按每lml的数量【liàng】分配到冻存管中。本【běn】公司按【àn】每个冻存【cún】管细【xì】胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落【luò】、破【pò】损及细胞有污染【rǎn】，请立即【jí】与我们电联。
所有动物【wù】细【xì】胞均视【shì】为【wéi】有潜【qián】在的生物危害性，必须【xū】在二【èr】级生物安全台内操作，并请注意防【fáng】护，所有【yǒu】废液【yè】及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：胰腺癌，肝转移
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胰腺癌细胞(Capan-1)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确【què】认细胞【bāo】生长状态【tài】，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶【píng】置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞【bāo】长【zhǎng】满（90%以上）请及时进【jìn】行【háng】细胞【bāo】传【chuán】代，传代培养用【yòng】6ml本公司附带的*培养基。
5.接【jiē】到细胞次【cì】日【rì】，请检查细胞是否污染，若发现污【wū】染【rǎn】或【huò】疑似污染，请【qǐng】及时与我们取得电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。