大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 IVIgG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂【jì】取出放【fàng】置【zhì】30分钟，平衡至【zhì】室温，所有标准品【pǐn】和样品必需设置平行对照【zhào】实验，快【kuài】速【sù】加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀【yún】。

1. 依据实验键盘纸决定酶标【biāo】条【tiáo】的使用【yòng】量，将剩余的酶标条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑【sù】料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液至各个微孔中【zhōng】，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取【qǔ】50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔【kǒng】中，除【chú】了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作液至各孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板振【zhèn】动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸【xī】水纸上拍干微孔内溶液【yè】，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次【cì】，每次需拍干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无【wú】尘【chén】吸水【shuǐ】纸【zhǐ】上轻【qīng】巧酶标板数次，以确【què】保没【méi】有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物【wù】溶液，于室【shì】温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物A和B需【xū】在临用前【qián】15分钟内等体【tǐ】积混【hún】合，并【bìng】避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动【dòng】扣除每【měi】个读【dú】数【shù】的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初【chū】次使【shǐ】用试剂盒时，应将各种试剂管离【lí】心数分钟，以【yǐ】便【biàn】试剂集中到管底【dǐ】。

2. 每次实验留一孔作【zuò】为空白【bái】调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只是【shì】zui后加底物溶【róng】液及2N H2SO4，测【cè】量时先用此孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸发，试验【yàn】时将反应板放于铺有【yǒu】湿【shī】布的密闭盒内【nèi】，酶标板【bǎn】加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于【yú】9-22℃保存，标准品、生【shēng】物-素标记【jì】抗体工作液【yè】、辣根过氧化物酶标记亲和【hé】素工作液【yè】请依据【jù】所需的量配【pèi】置使用【yòng】，请勿【wù】重【chóng】复使【shǐ】用已稀释过【guò】的标准品、生物-素标记抗体工【gōng】作液【yè】或、辣根过【guò】氧化物酶【méi】标记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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