大鼠DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 DHEAS7 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种【zhǒng】试剂取出放【fàng】置30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所有【yǒu】标准品和【hé】样品必【bì】需设置平行对【duì】照实验，快【kuài】速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实【shí】验键盘纸决定酶标条的【de】使用量，将剩【shèng】余的酶标【biāo】条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一【yī】起【qǐ】放回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移取50μL中【zhōng】和液【yè】至【zhì】各【gè】个微【wēi】孔【kǒng】中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结【jié】合）孔。

7. 移【yí】取【qǔ】50μL 偶联酶至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移【yí】取50μL 抗体工作液至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非【fēi】特异结【jié】合【hé】）孔。

9. 将酶标孔【kǒng】置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干【gàn】微孔内【nèi】溶液，加【jiā】洗涤【dí】液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各微孔，在干【gàn】净的【de】无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没【méi】有【yǒu】洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色【sè】底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底【dǐ】物A和B需在【zài】临用前【qián】15分钟内等体【tǐ】积混【hún】合【hé】，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光【guāng】密度值，在570nm至590nm之【zhī】间好有修【xiū】正【zhèng】，如果酶标【biāo】仪【yí】不能自【zì】动清除【chú】Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使用试【shì】剂盒时【shí】，应将各种试【shì】剂管【guǎn】离心数分钟，以便试剂【jì】集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验留一孔【kǒng】作为空【kōng】白调零【líng】孔，该孔【kǒng】不加任何试剂，只是zui后加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时【shí】先用此孔【kǒng】调OD值至零。

3. 为防止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应板【bǎn】放于铺有湿【shī】布的密【mì】闭【bì】盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶【méi】标板或者试剂【jì】，请于9-21℃保存【cún】，标准【zhǔn】品、生物-素标记抗体【tǐ】工【gōng】作液、辣根过【guò】氧化物酶标记【jì】亲【qīn】和素工作【zuò】液请依据所【suǒ】需的量【liàng】配置使用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标记【jì】抗体工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲【qīn】和素工【gōng】作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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