大鼠smActininα 试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 smActininα 试剂盒（酶联检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使【shǐ】用【yòng】前将各种试剂取出【chū】放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室【shì】温，所有标准品和样品必需设置平行【háng】对【duì】照实【shí】验，快速加入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据【jù】实【shí】验键盘纸决定酶【méi】标条的使用【yòng】量，将【jiāng】剩余【yú】的酶标条连同干【gàn】燥剂一起放回密封塑料【liào】袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液【yè】至各个微孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特【tè】异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品【pǐn】）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体工作【zuò】液至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶【méi】标【biāo】孔【kǒng】置于孔板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时【shí】。

10. 在吸水【shuǐ】纸上拍干微孔内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每孔洗【xǐ】3次，每次需【xū】拍干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干净的【de】无尘吸水纸上轻巧酶【méi】标板数次，以确【què】保没有洗涤【dí】液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶液，于【yú】室【shì】温【wēn】静置【zhì】5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分【fèn】钟内【nèi】等体积混合，并避【bì】光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值【zhí】，读取450nm处的光密度【dù】值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果酶标仪不能【néng】自动清除【chú】Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动扣除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数【shù】分【fèn】钟，以便【biàn】试剂【jì】集中【zhōng】到管底。

2. 每次实验【yàn】留一【yī】孔【kǒng】作为空白调零孔，该孔不【bú】加【jiā】任何试剂，只是zui后加底物溶液【yè】及2N H2SO4，测【cè】量时先用【yòng】此孔调OD值至零。

3. 为【wéi】防【fáng】止【zhǐ】样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密【mì】闭盒【hé】内【nèi】，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未【wèi】使用完的酶标【biāo】板或者试剂，请【qǐng】于9-21℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记抗体【tǐ】工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作【zuò】液请依据所需【xū】的量配置使用，请勿重复使【shǐ】用已【yǐ】稀释过【guò】的【de】标准【zhǔn】品、生物-素【sù】标【biāo】记抗体工【gōng】作液或、辣【là】根过氧化【huà】物酶标记亲【qīn】和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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