大鼠6-K-PG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 6-K-PG ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试剂取出放置【zhì】30分钟，平衡至室【shì】温【wēn】，所【suǒ】有标准品和样品必需【xū】设置平行对【duì】照实【shí】验，快速加入试剂至样品中，立【lì】即漩涡震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据【jù】实验键盘纸决定酶【méi】标条【tiáo】的使用量，将剩余的酶【méi】标条连【lián】同干燥剂一【yī】起放回密【mì】封塑料袋，密【mì】封，4℃保存【cún】。

2. 移取50μL中和【hé】液至【zhì】各【gè】个【gè】微孔中，除了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔。

3. 移取【qǔ】100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取【qǔ】50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联【lián】酶至各孔中，除了TA（全【quán】活性【xìng】）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体【tǐ】工【gōng】作【zuò】液至各孔中【zhōng】，除了TA（全【quán】活性）孔、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标孔置于孔板【bǎn】振动【dòng】器上，250~500rpm，室温【wēn】孵育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔内溶液【yè】，加洗涤【dí】液400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次【cì】洗【xǐ】涤，清空【kōng】各微孔，在干净的【de】无【wú】尘【chén】吸水纸上轻巧酶标板数次，以【yǐ】确保没有洗涤【dí】液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液【yè】，于室温静【jìng】置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需在临用前15分钟内等【děng】体积混合，并避【bì】光【guāng】放【fàng】置【zhì】）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶【méi】标仪Blank（空白）孔值，读取【qǔ】450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果酶标【biāo】仪不能自动清除【chú】Blank(空白)孔值【zhí】，那么手动扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔【kǒng】光密度【dù】值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次使用【yòng】试剂盒时，应将各种试剂管离心【xīn】数分钟，以便试剂集中到【dào】管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该【gāi】孔不加任【rèn】何试【shì】剂，只是zui后加底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先【xiān】用此【cǐ】孔调OD值至零【líng】。

3. 为防止样品蒸【zhēng】发，试验时将反【fǎn】应板【bǎn】放于铺有湿布【bù】的【de】密闭盒内【nèi】，酶标板加【jiā】上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用完的酶【méi】标板或者试剂，请于9-21℃保存【cún】，标准品、生物-素标【biāo】记抗体工作液【yè】、辣根过氧【yǎng】化【huà】物【wù】酶【méi】标记亲和【hé】素工作液请依【yī】据【jù】所【suǒ】需的量配置使用，请勿重复使用已稀【xī】释过的【de】标准品、生物-素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶【méi】标记亲【qīn】和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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