大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取出放置30分钟，平衡【héng】至室温，所有标准品和样品必需设置平【píng】行对照【zhào】实验，快速【sù】加【jiā】入试剂至样品中，立即【jí】漩涡震荡2秒混【hún】匀【yún】。

1. 依据实验键盘纸【zhǐ】决定【dìng】酶标条的使用【yòng】量，将剩余的【de】酶标条连同干燥剂一起放回密封【fēng】塑料袋，密封【fēng】，4℃保存。

2. 移取【qǔ】50μL中和【hé】液至各个微孔中，除【chú】了TA（全活性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异结合【hé】)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联酶【méi】至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活性【xìng】）孔【kǒng】、Blank（空白【bái】）孔和【hé】NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将酶标孔置于【yú】孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育【yù】2小时【shí】。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶液【yè】，加洗涤液【yè】400μL每孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后【hòu】一【yī】次洗涤，清空各微孔，在【zài】干净的【de】无尘吸水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶标板数次，以确保没有洗涤液【yè】残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显【xiǎn】色底物A和B需【xū】在临用前15分【fèn】钟内等体积混【hún】合，并避光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读【dú】取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好【hǎo】有修正，如果【guǒ】酶标仪不【bú】能自动清【qīng】除【chú】Blank(空白)孔【kǒng】值，那么手动【dòng】扣除【chú】每个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒【hé】时【shí】，应将【jiāng】各种试剂管离心【xīn】数分【fèn】钟【zhōng】，以便【biàn】试剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作【zuò】为空白调零孔，该孔不加任【rèn】何试剂，只【zhī】是【shì】zui后【hòu】加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此孔调【diào】OD值至零。

3. 为【wéi】防止样品蒸【zhēng】发，试验时将反应板放【fàng】于铺有【yǒu】湿布的密闭盒内，酶标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使【shǐ】用【yòng】完的酶标板或者试剂，请于9-21℃保存【cún】，标准品【pǐn】、生物【wù】-素标【biāo】记抗体工作【zuò】液、辣根过氧化【huà】物酶标记亲和素工作液请依据所【suǒ】需的量配置使【shǐ】用，请勿重复【fù】使用已稀释【shì】过【guò】的标准品【pǐn】、生物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素【sù】工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 MMP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联生物现货供应，包括MMP-5 ELISA试【shì】剂盒、酶【méi】联免疫检测试剂盒【hé】说明书、实验原理、操作【zuò】步骤【zhòu】等产品【pǐn】详细介绍。