大鼠 MMP-4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MMP-4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前【qián】将各种试【shì】剂取出放置30分钟【zhōng】，平【píng】衡至室温，所有【yǒu】标准品和样品必需设置平行【háng】对照实【shí】验，快速加入试剂至样品中【zhōng】，立即漩【xuán】涡【wō】震荡【dàng】2秒【miǎo】混匀。

1. 依据实【shí】验【yàn】键盘纸【zhǐ】决【jué】定酶标条【tiáo】的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回【huí】密封塑【sù】料袋，密封，4℃保存。

2. 移【yí】取50μL中和液【yè】至各个微孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异【yì】结【jié】合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异【yì】结合）孔。

7. 移取【qǔ】50μL 偶联【lián】酶至【zhì】各孔中，除了TA（全【quán】活性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗体工【gōng】作液至各【gè】孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空【kōng】白【bái】）孔和【hé】NSB（非特异【yì】结合）孔。

9. 将【jiāng】酶标孔置【zhì】于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵【fū】育【yù】2小时【shí】。

10. 在吸【xī】水纸【zhǐ】上拍干微孔内溶【róng】液，加洗涤液400μL每孔【kǒng】洗3次，每次需【xū】拍【pāi】干。

11. 后【hòu】一次洗涤，清空各微孔，在干【gàn】净的无尘吸【xī】水纸上【shàng】轻【qīng】巧酶标【biāo】板数次，以确保没有洗【xǐ】涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显【xiǎn】色底物溶液【yè】，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和【hé】B需在【zài】临用【yòng】前15分钟内等体积【jī】混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光【guāng】密度值【zhí】，在570nm至590nm之间好有修正，如果酶【méi】标仪不能自动清【qīng】除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手【shǒu】动扣除每个【gè】读数的Blank（空【kōng】白）孔光【guāng】密度【dù】值【zhí】。

注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应【yīng】将各【gè】种试剂管【guǎn】离心【xīn】数分钟，以便试剂集【jí】中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂【jì】，只是【shì】zui后【hòu】加底物【wù】溶液及2N H2SO4，测量时先用此【cǐ】孔调【diào】OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时【shí】将反应板放于铺有湿【shī】布的【de】密闭盒内【nèi】，酶标板加上盖或【huò】覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者【zhě】试剂，请于9-21℃保存【cún】，标准品、生物-素标记抗【kàng】体工【gōng】作液、辣【là】根过氧【yǎng】化物酶标【biāo】记亲【qīn】和素工【gōng】作液【yè】请依据所需的量【liàng】配置使用【yòng】，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物【wù】-素【sù】标记抗体【tǐ】工作液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工作液【yè】。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 MMP-4 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶【méi】联生物现货供应【yīng】，包括MMP-4 ELISA试剂盒【hé】、酶联免疫检测试剂盒说明书、实验【yàn】原理、操作【zuò】步骤【zhòu】等产品详细【xì】介绍。