大鼠 MIP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 MIP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各【gè】种试剂取出放【fàng】置30分【fèn】钟，平【píng】衡至室温【wēn】，所有标准品和样品必需设置平行对【duì】照实验【yàn】，快速加入试剂至【zhì】样【yàng】品中【zhōng】，立即【jí】漩【xuán】涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键【jiàn】盘纸【zhǐ】决定酶标条的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条【tiáo】连同【tóng】干燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个微【wēi】孔中【zhōng】，除了TA（全活性【xìng】）孔和【hé】Blank（空白）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非【fēi】特异结合)孔和【hé】B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取【qǔ】50μL 抗体【tǐ】工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将酶标孔置于孔【kǒng】板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵【fū】育2小时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干微孔内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每【měi】次需拍【pāi】干【gàn】。

11. 后一次洗涤，清空各【gè】微孔，在干净的无尘吸【xī】水【shuǐ】纸上轻【qīng】巧酶标板【bǎn】数次，以确保【bǎo】没有洗【xǐ】涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底【dǐ】物【wù】溶液，于室温静置【zhì】5~30分钟【zhōng】。（显色【sè】底物A和B需在临用【yòng】前15分钟内等体积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔【kǒng】值【zhí】，读取450nm处的光【guāng】密度值【zhí】，在【zài】570nm至590nm之间好有修正，如果【guǒ】酶标仪不能自【zì】动清除Blank(空白)孔值【zhí】，那么手【shǒu】动扣除【chú】每个读数的Blank（空白）孔【kǒng】光密度值。

注意事项：

1. 用【yòng】户在初次【cì】使用【yòng】试剂盒时，应【yīng】将各【gè】种试剂管离心数分钟，以便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空【kōng】白调零孔，该孔【kǒng】不加任何【hé】试剂，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4，测量时先【xiān】用【yòng】此孔调【diào】OD值至【zhì】零。

3. 为防止样【yàng】品蒸【zhēng】发，试【shì】验时将反应板放于铺有湿【shī】布【bù】的密闭盒内，酶标【biāo】板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板【bǎn】或者试剂【jì】，请于9-21℃保存，标准品、生物-素【sù】标记抗体工作液【yè】、辣【là】根过氧化【huà】物酶标记亲和素【sù】工作液请【qǐng】依据所需的量配置【zhì】使用，请勿重复使用已稀【xī】释过【guò】的标准品、生物-素标记抗【kàng】体工作【zuò】液或、辣根过氧【yǎng】化物酶标记【jì】亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠 MIP-5 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）由上海酶联生物现货供应，包【bāo】括MIP-5 ELISA试剂【jì】盒、酶联【lián】免疫【yì】检测试剂盒说明【míng】书、实验原【yuán】理【lǐ】、操作步骤等产品【pǐn】详细介【jiè】绍。