大鼠回肠细胞（IEC-18）

大鼠回肠细胞(IEC-18)
细胞介绍该细胞来源于大鼠肠上皮细胞。
细胞特性
1)来源：大鼠肠上皮
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下确认细胞生长状态【tài】，去掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞【bāo】长满【mǎn】（90%以上）请及时进行细胞传【chuán】代【dài】，传代培养用6ml本公司附带的*培养基【jī】。
5.接到【dào】细胞【bāo】次【cì】日，请检查细胞是【shì】否污染，若发现污染或【huò】疑似污染，请【qǐng】及时与我们取【qǔ】得电联。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)细胞用途：
仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备DMEM培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，95%;胎牛血【xuè】清，5%，添加0.1U/ml胰岛素。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱【xiāng】湿度【dù】为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细【xì】胞【bāo】：将【jiāng】含【hán】有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅速【sù】放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇【yáo】晃解冻，移入事先【xiān】准【zhǔn】备好的【de】含有4mL培养基的15ml离心管中混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加【jiā】入lmL培养基后【hòu】吹匀。然后【hòu】将所有【yǒu】细胞悬液移入含有【yǒu】5ml培【péi】养基的培养瓶【píng】中培养过夜。第【dì】二天换液并检查细胞密度。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传【chuán】代可参考以下方【fāng】法：弃去培养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。 力口【kǒu】 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后【hòu】在【zài】显微【wēi】镜【jìng】下【xià】观察【chá】细胞【bāo】消化情况，若【ruò】细胞大部分变圆并脱落，迅【xùn】速【sù】拿【ná】回作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细【xì】胞【bāo】的培养基【jī】终止消化。轻轻吹打后吸出【chū】，移入【rù】15ml离心管中【zhōng】，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培【péi】养【yǎng】液后【hòu】吹匀。移【yí】入到事先【xiān】准备好的含有5ml培养基【jī】的【de】T-25培【péi】养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养。
 
细胞冻存：
待细胞生【shēng】长状态良【liáng】好时，可进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法【fǎ】按照【zhào】细【xì】胞【bāo】传【chuán】代方【fāng】法的9-21步骤进行，后的重悬液使用血清【qīng】。悬【xuán】浮细胞直接【jiē】计数后离【lí】心【xīn】，用血清重悬【xuán】浮，加【jiā】DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速【sù】混匀【yún】，按每lml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管【guǎn】细胞数目大于【yú】1X106个细胞冻【dòng】存【cún】。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污染【rǎn】，请立即【jí】与我【wǒ】们电【diàn】联【lián】。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜在【zài】的生物危害性，必须在【zài】二级生【shēng】物安【ān】全台内操【cāo】作，并【bìng】请注意防【fáng】护，所有废【fèi】液及接触【chù】过此细胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能【néng】丢弃。