大鼠胰岛0细胞瘤细胞（RIN-m5F）

大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)
细胞介绍
该细胞【bāo】是大【dà】鼠【shǔ】胰岛细胞【bāo】RIN-m的克隆，分泌胰岛素及【jí】L型多巴脱羧【suō】酶，不产生生长激素抑制激【jī】素。
 
细胞特性
1)来源：大鼠，胰岛
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输【shū】和保存：使用T25瓶充液【yè】发【fā】送活【huó】细胞。收到【dào】细胞后，请【qǐng】先【xiān】在显微镜下检查细胞生长【zhǎng】状态，并将T25瓶置于培养【yǎng】箱约6h或过【guò】夜后【hòu】，再次【cì】检查细【xì】胞状态。若状态良好【hǎo】，可进行细【xì】胞后续处理操作，按照【zhào】以下方式进行。若发【fā】现【xiàn】可疑污【wū】染物【wù】，请及时与【yǔ】我们取得电联。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO，添加【jiā】 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠【nà】O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞【bāo】：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇【yáo】晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离【lí】心4分【fèn】钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养基【jī】后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液加入【rù】培养瓶中培养过夜（或【huò】将
细胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入【rù】约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换液【yè】并检查【chá】细胞密度。
 
细胞【bāo】传代：如果细胞密度【dù】达80%-90%，即【jí】可进行传代培养。弃去培养上清，用【yòng】不含钙、镁【měi】离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养【yǎng】箱中消化9-21分【fèn】钟【zhōng】，然【rán】后在显【xiǎn】微【wēi】镜下观察【chá】细胞消化情况，若【ruò】细【xì】胞【bāo】大部分变圆并脱落【luò】，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀。 将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分【fèn】到新的含【hán】8ml培【péi】养基【jī】的新皿中或者瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞【bāo】冻存【cún】。贴【tiē】壁细【xì】胞【bāo】冻【dòng】存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后，加【jiā】入约【yuē】lml含血清的培养基后【hòu】加入冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存【cún】。
 
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污染，请立即与我们【men】电联。所有【yǒu】动物【wù】细【xì】胞均视为有潜在的生【shēng】物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并【bìng】请注【zhù】意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及接【jiē】触过【guò】此细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方【fāng】能【néng】丢弃。