大鼠胰岛细胞瘤细胞（INS-1）

大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)
细胞介绍
该细胞【bāo】源自X射线照射的【de】移【yí】植胰岛瘤的大鼠，胰岛素阳性【xìng】，可合成胰岛素原【yuán】I和II，可【kě】用于beta细【xì】胞功能【néng】研究。
 
细胞特性
1)来源：大鼠移植胰岛瘤
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保【bǎo】存【cún】：使用【yòng】含【hán】有胎牛血【xuè】清的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收到细胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后【hòu】，于洁净操作【zuò】台弃【qì】去上清，加入推荐使用的【de】培养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中【zhōng】培养，传代达到细胞生长状态良好时【shí】，再【zài】进行冻存。具【jù】体操作见细胞培养步【bù】骤。
 
大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%，添【tiān】加50|amol/L(3 —疏基乙【yǐ】醇。
2.培【péi】养条件：气相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀【yún】。然后将所有【yǒu】细胞悬液【yè】加入培养【yǎng】瓶中培养过夜（或将细胞【bāo】悬液加【jiā】入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培【péi】养基，培养过夜【yè】）。第二天换液【yè】并检【jiǎn】查细胞密【mì】度。细胞传代：如果细【xì】胞【bāo】密【mì】度达【dá】80%-90%，即可进行传【chuán】代培养【yǎng】。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用【yòng】不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细【xì】胞9-21次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶【píng】中，置于37°C培养【yǎng】箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显微镜【jìng】下【xià】观【guān】察细胞消化情况，若细胞【bāo】大【dà】部分变圆并脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下【xià】培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清【qīng】液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀。将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比【bǐ】例【lì】分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或【huò】者瓶【píng】中【zhōng】。
细胞【bāo】冻存：待细胞【bāo】生【shēng】长状态良【liáng】好时，可进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细【xì】胞【bāo】变圆脱【tuō】落后，加入约lml含【hán】血【xuè】清【qīng】的培【péi】养基后加【jiā】入冻【dòng】存管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发【fā】干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污【wū】染，请【qǐng】立即与我【wǒ】们【men】电联【lián】。
所有动物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液【yè】及接触【chù】过【guò】此细【xì】胞的【de】器【qì】皿需【xū】要灭菌后方能【néng】丢弃【qì】。