大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）

大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)
细胞介绍
NR8383(正常【cháng】大鼠，1983年)来源于肺【fèi】灌洗时的正常【cháng】大鼠肺泡【pào】巨【jù】噬细【xì】胞。细胞在gerbil肺【fèi】细【xì】胞【bāo】连续【xù】培养液存在下培养了大约9-21个月。随后，不再【zài】需要外源生长因子。通过【guò】有限稀释【shì】法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细【xì】胞，并三次【cì】用软琼脂亚【yà】克隆。细胞表现出巨噬【shì】细胞【bāo】的【de】特性，吞噬酵母多糖和铜绿，非【fēi】特异性脂酶活性，Fc受体，氧【yǎng】化降解；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重复地【dì】响应外源生【shēng】长因子。NR8383细胞响应【yīng】博莱霉素，分泌TGF-0前体。在【zài】博莱霉素刺激下，TGF-(3mRNA表达也上升【shēng】。细【xì】胞对内毒素敏【mǐn】感。9-21钠克【kè】/毫升【shēng】的【de】LPS水平抑制增生达50%。即使达到【dào】0.001毫克【kè】/毫【háo】升的水平，LPS抑【yì】制还【hái】是无毒且在后【hòu】续过程中可逆【nì】NR8383细胞株提【tí】供了高响应【yīng】的肺泡巨噬细胞的均【jun1】一来源，可以用于【yú】体【tǐ】外研究【jiū】巨【jù】响细胞相关活性。
 
细胞特性
1)来源：肺；巨噬细胞
2)形态：巨噬细胞，半悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞接受后的处理：
1)收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下【xià】确认细胞生长状态【tài】，去掉封口膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养【yǎng】约【yuē】2-3h〇
3)弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4) 如【rú】果【guǒ】细胞长满（90%以上）请及时进行细【xì】胞传代，传【chuán】代培养【yǎng】用6ml本公司附【fù】带【dài】的*培养基。
5)接到细胞次【cì】日，请检查【chá】细胞是否污染，若发现【xiàn】污染或疑似【sì】污染，请及时【shí】与我【wǒ】们【men】取得电联。
 
细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
 
一.培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】F-12K培养基（F-12K，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2.培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培【péi】养箱【xiāng】湿度【dù】为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
二.细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅【xùn】速放入37°C水浴中（水面要低【dī】于【yú】冻存【cún】管盖部）摇晃解冻，移入事先准备【bèi】好的含有4mL培【péi】养【yǎng】基的15ml离心管中混【hún】合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培
养基后【hòu】吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细【xì】胞悬液移入含【hán】有【yǒu】5ml培养基的【de】培养瓶中培养【yǎng】过夜。第二天【tiān】换液并检查细胞密度。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条【tiáo】件【jiàn】下离心【xīn】5分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹句，将细【xì】胞悬液【yè】按【àn】1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。（该细胞建议使【shǐ】用*种方法【fǎ】，将所有细胞收集【jí】起【qǐ】来【lái】）
方法【fǎ】二：可【kě】选择半数换液【yè】方式，弃去半数【shù】培【péi】养基后，将【jiāng】剩【shèng】余【yú】细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶中。
 
细【xì】胞冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时【shí】，可进行细胞冻存。悬浮细胞【bāo】冻存时，应将细胞收集【jí】，1000RPM，常温【wēn】条件【jiàn】下离【lí】心5分钟，少量【liàng】保存【cún】上【shàng】清【qīng】液（防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，吹【chuī】打均匀【yún】后，加入到冻【dòng】存管中，在冻存管【guǎn】
中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)注意事项：
收到【dào】细【xì】胞【bāo】后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶【píng】盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染【rǎn】，请立即与我们电【diàn】联。
所有动物【wù】细胞【bāo】均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必【bì】须在二【èr】级生物安全台【tái】内操【cāo】作，并请注意防护，所有废液及接触【chù】过此细胞的器皿【mǐn】需【xū】要灭菌后【hòu】方能丢【diū】弃。