大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12
细胞介绍：
该【gāi】细【xì】胞【bāo】系来自能移植的雄性大【dà】鼠肾【shèn】上腺嗜铬细胞瘤。这【zhè】些细胞表【biǎo】达神经生长因子(NGF)受体【tǐ】。NGF可诱导产生【shēng】神经表【biǎo】型。这些细胞不合【hé】成肾上腺素。
  
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPMI-1640:GIBCO)，85%;马【mǎ】血清 10%胎【tāi】牛血【xuè】清5%。
2.培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞【bāo】：将【jiāng】含有lmL细胞悬【xuán】液【yè】的【de】冻存管在【zài】37°C水浴中【zhōng】迅速【sù】摇晃解冻，入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬【xuán】液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养基，培养过夜【yè】）。第二天换液并检
查细胞密度。
细胞【bāo】传代【dài】：如【rú】果细胞密度达80%-90%，即可进行传【chuán】代培养。对于贴壁【bì】细胞，传【chuán】代可参考以下【xià】方【fāng】法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-21次。力【lì】口2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消化【huà】情【qíng】况，若细胞大【dà】部分变圆并【bìng】脱落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基【jī】终止消【xiāo】化。
按【àn】6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养基，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条件下离心4分弃去【qù】上清液，补【bǔ】加【jiā】l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。
将【jiāng】细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新【xīn】的含8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中。细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生长状态良【liáng】好时，可【kě】进行【háng】细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃去培养基【jī】后加入少量胰【yí】酶，细胞变圆脱落后，加入【rù】约lml含血清的培【péi】养基【jī】后
加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
  
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞后，若【ruò】发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破损及【jí】细胞【bāo】有污染【rǎn】，请即与我们电联。
所【suǒ】有动【dòng】物细胞均视为有【yǒu】潜在【zài】的生物危【wēi】害性，必须【xū】在二级生物安全台内【nèi】操作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有【yǒu】废液及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  
细胞特性：
1)来源：肾上腺嗜铬细胞瘤
2)形态：多角形
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（低分化）PC-12运输【shū】和【hé】保存【cún】：使用含有胎【tāi】牛血清的2ml冻存管发【fā】送【sòng】存活【huó】细胞【bāo】。收到细【xì】胞【bāo】后，可在1000RPM，常温【wēn】条件下，离【lí】心5min后，于洁【jié】净操作【zuò】台弃去上清，加入推【tuī】荐使用的【de】培养【yǎng】基后转移至l〇cm培养【yǎng】皿或【huò】者T25培养瓶中培养【yǎng】，传代达【dá】到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细【xì】胞培养步骤【zhòu】。细胞用途：仅供使用。