人子宫内膜腺癌（转移）细胞 （AN3CA）

人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)
细胞介绍：
AN3CA细胞【bāo】建【jiàn】系于1964年【nián】。它衍生于子【zǐ】宫【gōng】内【nèi】膜癌患者淋【lín】巴【bā】结转移组织，具有癌 细胞的基本【běn】特性，能在体外【wài】长期传代【dài】培养，接种实验【yàn】动物产生明显肿瘤。但细胞的生物学【xué】特性及超微结构尚未深入研究，仅发现该细胞系促黑激素【sù】合成为阴性。细胞常【cháng】用【yòng】于人子【zǐ】宫内膜癌细胞生【shēng】物学及其相【xiàng】关特【tè】性研究。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备MEM培养【yǎng】基【jī】(MEM:GIBCO)，90%;北美胎牛血【xuè】清(United States，GIBCO，货号16000-044)，10%。
2.培养条件【jiàn】：气相：空【kōng】气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现【xiàn】配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管在【zài】37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基【jī】后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或【huò】将 细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入【rù】约8ml培养基，培【péi】养过【guò】夜）。第二天换液并检查【chá】细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)对于贴壁细胞，传代可参考以下【xià】方法【fǎ】：弃去培养上清，用【yòng】不含钙、镁离子的【de】PBS润【rùn】洗细胞9-21次【cì】。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化【huà】9-21分【fèn】钟，然后在显微镜下【xià】观察细【xì】胞【bāo】消化情况，若细胞大部 分变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几【jǐ】下培养瓶后【hòu】加少量【liàng】培养基【jī】终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻打匀【yún】后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清【qīng】液【yè】，补加l-2mL培【péi】养液后吹【chuī】匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存【cún】：待细胞生【shēng】长状态良【liáng】好时，可进【jìn】行【háng】细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，弃【qì】去培【péi】养基后加入少量胰酶，细【xì】胞变圆脱落【luò】后，加【jiā】入约lml含血清的培【péi】养【yǎng】基后 加入冻存管【guǎn】中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后【hòu】，若发现干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶盖脱【tuō】落、破损及【jí】细胞有【yǒu】污染，请立即【jí】与我们电联【lián】。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级【jí】生物安全台内操作【zuò】，并【bìng】请注【zhù】意防护【hù】，所有废液及接触过【guò】此【cǐ】细胞【bāo】的器皿需【xū】要灭菌后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：子宫内膜
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
  
人子宫内膜腺癌(转移)细胞 (AN3CA)运【yùn】输和保存：使用【yòng】含【hán】有胎牛血清的2ml冻存【cún】管发【fā】送存活细胞。收到细胞后， 可在1000RPM，常温条【tiáo】件【jiàn】下，离心5min后，于洁净操作台弃【qì】去【qù】上清，加【jiā】入推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养皿或者【zhě】T25培养瓶中【zhōng】培【péi】养，传代达到【dào】细胞生长【zhǎng】状态良好时，再【zài】进行冻存。具体操作见细胞培【péi】养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。