泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

英文名【míng】称：Uropathogenic Escherichia coli（UPEC）PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干【gàn】品）： 2瓶，请临用前【qián】15分钟内配制。每瓶以样品【pǐn】稀释【shì】液【yè】稀释【shì】至0.5ml，盖好【hǎo】后室温静置大约10分钟，同时反复颠【diān】倒/搓【cuō】动以【yǐ】助【zhù】溶解【jiě】，其浓【nóng】度为200 U/L，然后做系列【liè】倍比稀【xī】释（注【zhù】：不要直接在板【bǎn】中进行倍比稀释），分别配制【zhì】成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直【zhí】接作为空【kōng】白孔 0 U/L。如配制100 U/L标【biāo】准品：取0.3ml （不要少于【yú】0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混【hún】匀【yún】即可，其余【yú】浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒存放：样【yàng】本在【zài】2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可【kě】长期保【bǎo】存【cún】，但应【yīng】避【bì】免反复冻融（zui多冻融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异性：所有产品使用【yòng】的引物均【jun1】经过【guò】详尽的生【shēng】物信息学分析，经【jīng】过【guò】GenBank及自建【jiàn】庞大数据库的【de】比对【duì】，确保【bǎo】所用的每一条引物均为种属或血清型【xíng】特异的基【jī】因序【xù】列区段，可实现对种属及血清型的特异检测，特异【yì】性【xìng】均【jun1】达到100%。

2.重现性：该系列【liè】所有产品均经过大量【liàng】实验菌【jun1】株的验证，重现性为【wéi】100%。

3.灵【líng】敏【mǐn】性：该系列产品可实现对检测菌【jun1】的【de】高灵敏检测，当样【yàng】品中【zhōng】的浓度达到103cfu/ml时【shí】，可实现对其的直接检测，无需繁琐【suǒ】的增【zēng】菌过程。

4.实【shí】用性：检测范围【wéi】广，涵盖了对人体危【wēi】害【hài】较为严【yán】重【chóng】的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床【chuáng】样品及其他环【huán】境取样的快速检【jiǎn】测，整个【gè】检【jiǎn】测过程【chéng】为9-21个小时【shí】。

5.优势【shì】1：序列【liè】资【zī】源【yuán】丰富【fù】，除GenBank公布的序列外，公司还进【jìn】行了大量菌株的序列【liè】破译，从理论上保证所选引物【wù】具有良好的保守性【xìng】和特异【yì】性。

6.优【yōu】势2：该系列试剂盒均经【jīng】过大量的保守【shǒu】性及特【tè】异性实验验证，凭借公【gōng】司拥有的丰富的【de】菌种【zhǒng】资源，每一种检测【cè】试剂【jì】盒均经过【guò】了20余【yú】种标准菌株和临床菌【jun1】株的保守性验证及【jí】40余【yú】种【zhǒng】近缘标准菌株和临床【chuáng】菌株的特异【yì】性验证【zhèng】，确保在【zài】使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴【yīn】性报告结【jié】果。

使用方法：

注【zhù】：所有试剂使用前需*解冻，混【hún】合【hé】均【jun1】匀，6,000rpm离心数秒后【hòu】使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样【yàng】本的核酸提取可采用病毒RNA提【tí】取试剂【jì】盒或自动化核酸提取仪等，具体提【tí】取方【fāng】法请参【cān】照相【xiàng】关说明书。阳性质控品及阴性【xìng】质控品【pǐn】无【wú】需提【tí】取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性【xìng】质控品+待检【jiǎn】样本+阳性质【zhì】控品【pǐn】）PCR反【fǎn】应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头【tóu】份【fèn】用【yòng】量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总【zǒng】量，两者混匀离【lí】心后分【fèn】装【zhuāng】20 μl至单个PCR反应【yīng】管)。组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于【yú】6,000rpm离心30s，转移至【zhì】样本处【chù】理区。

2.泌尿道致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在【zài】上述的PCR反应管中【zhōng】分别加入待【dài】检样本RNA提取物、阴性【xìng】质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心【xīn】10s，转移至扩增区。