绵羊鞭虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：绵羊鞭虫PCR检测试剂盒

英文名称：Trichuris ovisPCR

准备物品：

清【qīng】理液（A）                                   毫升

染【rǎn】色【sè】液（t B）                                 微升

稀【xī】释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                  毫升

产【chǎn】品说明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的【de】物质主要有五种即引物【wù】、酶、dNTP、模板和【hé】Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，绵羊鞭虫PCR检测试剂盒PCR 产【chǎn】物【wù】的特异【yì】性取决于引物【wù】与模板DNA互补的程度。理【lǐ】论上，只要【yào】知道【dào】任何一段【duàn】模板DNA序列， 就能按【àn】其设计互【hù】补【bǔ】的寡核苷酸链做引物，利用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下【xià】原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引【yǐn】物扩【kuò】增跨度： 以200-500bp为宜【yí】，特定条件下可扩增长【zhǎng】至10kb的片段。

③引物【wù】碱基：G+C含量【liàng】以9-21%为宜【yí】，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现【xiàn】非【fēi】特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上【shàng】的【de】嘌呤【lìng】或嘧啶核【hé】苷酸的成串排列【liè】。

④避免引【yǐn】物内部出现二级结构，避免两【liǎng】条引【yǐn】物间互补，特别是3'端的互补，否则会形【xíng】成引物二聚体，产【chǎn】生非【fēi】特【tè】异的【de】扩增条带【dài】。

⑤引【yǐn】物3'端的碱基【jī】，特别是末及【jí】倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避【bì】免因末端碱基【jī】不配【pèi】对而导致PCR失败。

⑥引【yǐn】物【wù】中有或能加上【shàng】合【hé】适的酶切位点， 被扩增的【de】靶序列*有适【shì】宜的酶【méi】切位点， 这【zhè】对酶切分析或分子克隆【lóng】很有好处。

⑦引物的特【tè】异性：引物应与核酸【suān】序列【liè】数据【jù】库【kù】的其它【tā】序列无明显同源性。

引物量【liàng】：每【měi】条引物的浓度【dù】0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生【shēng】所需【xū】要的结果为好，引物浓度偏高会引起错【cuò】配【pèi】和非特异性【xìng】扩增，且可增【zēng】加引物之间形成二聚体的【de】机会。