木霉属通用PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：木霉属通用PCR检测试剂盒

英文名称：Trichoderma spp.PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请【qǐng】临用前15分钟内配【pèi】制。每【měi】瓶【píng】以样【yàng】品稀释液稀释【shì】至0.5ml，盖好后室温【wēn】静置【zhì】大约【yuē】10分钟，同时【shí】反复颠倒/搓动【dòng】以助溶解【jiě】，其【qí】浓度为200 U/L，然后做系【xì】列【liè】倍比稀释（注：不要直接【jiē】在板中进行倍比【bǐ】稀【xī】释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样【yàng】品稀【xī】释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释【shì】液【yè】的Eppendorf管中，混匀即【jí】可，其余浓度以此类推【tuī】。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、木霉属通用PCR检测试剂盒存放：样【yàng】本在【zài】2~8℃条件下保存【cún】应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但【dàn】应避【bì】免反复【fù】冻融（zui多冻【dòng】融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有【yǒu】产【chǎn】品【pǐn】使用的引物均【jun1】经过详尽的生物【wù】信息学【xué】分析，经过【guò】GenBank及自建庞【páng】大数据库的比对，确保所用的每一【yī】条引【yǐn】物均为种【zhǒng】属或血清型特异的基因序列区段，可实【shí】现对【duì】种属及血清型的特异检测【cè】，特异性【xìng】均达到100%。

2.重现性：该系列所有产【chǎn】品均经过大【dà】量实验菌株的验【yàn】证【zhèng】，重现【xiàn】性为【wéi】100%。

3.灵敏性：该系【xì】列产品可实【shí】现对检测菌的高灵敏检测【cè】，当样品中的浓度达到【dào】103cfu/ml时，可【kě】实【shí】现对其的【de】直【zhí】接检测，无【wú】需繁琐的增菌过程。

4.实用【yòng】性：检测范围广，涵盖了对【duì】人体危害【hài】较为严【yán】重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床【chuáng】样品及其【qí】他环境取样【yàng】的快【kuài】速检测，整个检测过【guò】程为9-21个【gè】小时【shí】。

5.优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列【liè】外，公司还进行了【le】大量菌株的序【xù】列【liè】破译，从理论上保【bǎo】证所选引物具【jù】有良好【hǎo】的保守【shǒu】性和特异【yì】性。

6.优势2：该【gāi】系列试剂盒均经过大量的保守性【xìng】及特异性实【shí】验验证，凭借【jiè】公司拥【yōng】有的丰富的菌种【zhǒng】资源【yuán】，每一种检测试剂盒均经过了20余种【zhǒng】标准菌株和【hé】临【lín】床菌株的【de】保守【shǒu】性【xìng】验证及40余种近缘标【biāo】准【zhǔn】菌株和临【lín】床菌【jun1】株的特异【yì】性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假【jiǎ】阳性及假阴性报告结【jié】果。

使用方法：

注：所有试【shì】剂使用前【qián】需*解冻【dòng】，混【hún】合均匀，6,000rpm离【lí】心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核【hé】酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或【huò】自动化核酸【suān】提取仪等，具【jù】体提取【qǔ】方【fāng】法【fǎ】请参照相关说明书。阳性质控【kòng】品及阴性质【zhì】控【kòng】品无需提【tí】取，可直接【jiē】使【shǐ】用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取【qǔ】N个（N=阴性质控品【pǐn】+待【dài】检样本+阳性质控【kòng】品【pǐn】）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每【měi】头份用量计【jì】算N+1份【fèn】FMD RT-PCR反【fǎn】应液、RT-PCR酶所【suǒ】需总【zǒng】量，两【liǎng】者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管【guǎn】)。组分每头份【fèn】用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离【lí】心30s，转移至【zhì】样【yàng】本处理【lǐ】区【qū】。

2.木霉属通用PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管【guǎn】中分【fèn】别加【jiā】入待【dài】检样本RNA提【tí】取【qǔ】物、阴性质【zhì】控品和阳【yáng】性质【zhì】控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。