大鼠肝星形细胞（CFSC-8B）

大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)
细胞介绍该细胞于原代末期冻存。
细胞特性
1)来源：大鼠肝脏
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先【xiān】在显微镜下确认细胞生【shēng】长状态，去掉封【fēng】口膜并将【jiāng】T25瓶置【zhì】于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长满【mǎn】（90%以上）请及时进行【háng】细胞传代【dài】，传代培养用6ml本公【gōng】司附带的*培【péi】养【yǎng】基。
5.接到【dào】细胞次日，请检查细胞是【shì】否污【wū】染，若【ruò】发【fā】现污染或疑【yí】似污染，请及【jí】时与我们【men】取得电联。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基【jī】(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞【bāo】悬液的冻【dòng】存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻【dòng】，移入【rù】事先准备好的含有【yǒu】4mL培养【yǎng】基的15ml离心管【guǎn】中混【hún】合均匀【yún】。
在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液【yè】，加入lmL培养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬液移【yí】入含有5ml培养【yǎng】基的培【péi】养瓶【píng】中培养过【guò】夜。
第二天换液并检查细胞密度。
 
细【xì】胞传代：如【rú】果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培【péi】养。对于【yú】贴壁细【xì】胞，传代可参考以下方法：弃去培养上清，用【yòng】不【bú】含钙、镁离子【zǐ】的PBS润【rùn】洗细胞【bāo】9-21次。
 力口 2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养【yǎng】瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-21分钟【zhōng】，然【rán】后【hòu】在显微镜下观察细胞消化【huà】情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下【xià】培养瓶【píng】后加入3ml此细胞的培【péi】养基终止【zhǐ】消化【huà】。
轻【qīng】轻吹打【dǎ】后吸出，移【yí】入15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上清液，加【jiā】入lmL培养液后吹匀。
移入到事先准备好【hǎo】的含有5ml培养基的【de】T-25培养瓶中或【huò】含有【yǒu】14ml培养基的T-75培养瓶【píng】中培【péi】养。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
贴壁细胞【bāo】冻存【cún】时，先要【yào】消化处理并进行【háng】细胞【bāo】计数。消化方法按照细胞【bāo】传代方法【fǎ】的9-21步骤进行，后的重悬液使用血【xuè】清。悬浮细【xì】胞直接计数后离【lí】心，用血清重悬浮【fú】，加【jiā】DMSO至终【zhōng】浓度【dù】为10%。
加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。
本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干冰己挥发干【gàn】净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖脱落【luò】、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我【wǒ】们电联【lián】。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在【zài】的生物危害性，必须在二级【jí】生物【wù】安全台内操作【zuò】，并请注意防护，所有【yǒu】废液及【jí】接触过此细胞【bāo】的【de】器皿【mǐn】需要灭菌后方【fāng】能丢弃。