人舌鱗癌细胞（Tca-8113）

人舌鱗癌细胞(Tca-8113)
细胞介绍：
Tca-8113源自属于【yú】I级【jí】鳞癌【ái】(T2NlAmo, II stage)的原【yuán】位舌癌的活组织检查切【qiē】片。通【tōng】过干贴壁方法建立于【yú】1987年，传代【dài】时间为38小时【shí】。传代【dài】第三天有丝分裂指数为61%，移植【zhí】效率为86%，软琼脂克【kè】隆率为9-21.7%。ATS处理后在ICR和C57B1
小鼠中成瘤。电镜和组化特征与鳞癌相符。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基【jī】(RPIVM-1640:GIBCO,添加【jiā】 NaHC031.5g八【bā】, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠【nà】O.llg八)，80%;胎牛血清，20%。
2. 培【péi】养【yǎng】条件：气相【xiàng】：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管【guǎn】在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养【yǎng】基混【hún】合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然后【hòu】将所有细胞悬液加入培【péi】养瓶中培【péi】养过夜【yè】（或将细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养【yǎng】过夜【yè】）。第二天换【huàn】液并【bìng】检查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上清，用不含【hán】钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然后在【zài】显微镜【jìng】下观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大【dà】部分变圆并脱落，迅速【sù】拿【ná】回【huí】操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补加培养【yǎng】基【jī】，轻【qīng】轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上清液【yè】，补【bǔ】加l-2mL培养【yǎng】液后吹匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基【jī】的新皿中或者【zhě】瓶【píng】中。
 
细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生长【zhǎng】状态良好时【shí】，可进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加【jiā】入约lml含血清的培养基【jī】后【hòu】加入冻【dòng】存管中，再添【tiān】加【jiā】1〇%DMSO后进【jìn】行冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发【fā】现干冰己挥发【fā】干净、冻存【cún】管【guǎn】瓶盖脱【tuō】落、破损及细胞有污【wū】染，请立即与我们电联。
所有动物细胞均视为【wéi】有潜在【zài】的生物危【wēi】害性，必须在二级生物安全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废【fèi】液及接触过【guò】此细【xì】胞的器【qì】皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)运输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的【de】2ml冻存管发【fā】送存活细【xì】胞【bāo】。收到细胞后，可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净【jìng】操作台弃去上清【qīng】，加入推荐【jiàn】使用【yòng】的【de】培【péi】养基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良好时【shí】，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。