人前列腺癌细胞 （VCaP）

人前列腺癌细胞 (VCaP)
细胞介绍：
1997从一位不【bú】受激素影【yǐng】响的前列腺癌【ái】患【huàn】者脊椎转【zhuǎn】移灶【zào】中建立了这株细胞。先在【zài】小鼠中进行【háng】异种移植传代，随后进【jìn】行体外培养【yǎng】。体内及体外都对【duì】雄【xióng】性激素【sù】敏感。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM-H 培养基(DMEM-H，GIBCO，添【tiān】加【jiā】 NaHC031.5g/L)，90%;胎牛【niú】血清，10%。（DMEM 液体培养【yǎng】基：GIBCO，11995-065)。
2.培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液氮【dàn】储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速【sù】摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入4mL培【péi】养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬液加入培养瓶中【zhōng】培养过夜【yè】（或将细胞悬液加【jiā】入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细【xì】胞【bāo】密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人前列腺癌细胞 (VCaP)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细【xì】胞9-21次。力口2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞【bāo】大部分变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少【shǎo】量【liàng】培养基终【zhōng】止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培【péi】养【yǎng】基【jī】，轻轻打【dǎ】匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养液【yè】后吹匀。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含8ml培【péi】养基的【de】新皿中或者瓶中。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好【hǎo】时，可进行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱【tuō】落后，加入约lml含血【xuè】清的培【péi】养基后【hòu】 加入冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行【háng】冻存【cún】。

注意事项：
收到细胞【bāo】后，若【ruò】发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶【píng】盖脱落【luò】、破损及细胞【bāo】有污染，请【qǐng】立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物【wù】安全台内操作，并请注意防【fáng】护，所有废液及接触过此细【xì】胞【bāo】的【de】器【qì】皿【mǐn】需要灭【miè】菌后方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：前列腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人前列腺癌细胞 (VCaP)运输和保存：使用【yòng】含有胎牛【niú】血清的【de】2ml冻存管发送存活细【xì】胞【bāo】。收【shōu】到【dào】细胞后，可在1000RPM，常温【wēn】条件下，离心5min后，于洁净操【cāo】作【zuò】台弃【qì】去上清，加入推【tuī】荐使用的培养【yǎng】基【jī】后转移至l〇cm培养皿或者T75培养瓶【píng】中培养，传代达到【dào】细胞生长状态良【liáng】好时，再进【jìn】行冻存。具体操作见细【xì】胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。