人头颈鱗癌细胞 （Tu212）

人头颈鱗癌细胞 (Tu212)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM/F12 培养基【jī】(DMEM/F12:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相【xiàng】：空气【qì】，95%;二【èr】氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液【yè】：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管在【zài】37°C水浴中【zhōng】迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或【huò】将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿【mǐn】中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过【guò】夜）。第【dì】二【èr】天换液并检查【chá】细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人头颈鱗癌细胞 (Tu212)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细【xì】胞9-21次【cì】。力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶【píng】中，置【zhì】于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操作【zuò】台【tái】，轻敲几【jǐ】下培养瓶后加少量培【péi】养基终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀【yún】后【hòu】吸出【chū】，在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状态良好时，可进【jìn】行细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细胞【bāo】冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后，加入约lml含血清的【de】培【péi】养基后 加【jiā】入冻存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后【hòu】，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及细胞有污染【rǎn】，请立即与【yǔ】我们电【diàn】联。
所有动【dòng】物细胞均视为【wéi】有潜【qián】在的生物【wù】危害【hài】性，必须在二级生物安全【quán】台【tái】内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器【qì】皿需要【yào】灭菌后方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：头颈鳞癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人头颈鱗癌细胞 (Tu212)运输【shū】和保存【cún】：使用含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到【dào】细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下【xià】，离心5min后，于洁净操【cāo】作台弃去上【shàng】清，加【jiā】入【rù】推【tuī】荐使用的培养基后转【zhuǎn】移至【zhì】l〇cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时，再进行冻存。具【jù】体【tǐ】操作见【jiàn】细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。