人食管癌细胞（TE-1）

人食管癌细胞(TE-1)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2. 培养【yǎng】条件：气相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧【yǎng】化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅【xùn】速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均【jun1】匀。在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养基【jī】后吹匀【yún】。然【rán】后将所【suǒ】有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或【huò】将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加【jiā】入约8ml培养基，培养过【guò】夜）。第二天换液【yè】并检查【chá】细胞密【mì】度。
 
人食管癌细胞(TE-1)细胞传【chuán】代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代【dài】培养。弃去培养上清，用不含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消化【huà】液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培养【yǎng】箱中消化【huà】9-21分【fèn】钟【zhōng】，然【rán】后在【zài】显微镜下观【guān】察细胞消化情况，若细胞大部分变圆【yuán】并【bìng】脱【tuō】落，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几下培养【yǎng】瓶后加少量【liàng】培养【yǎng】基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻【qīng】轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养【yǎng】液后【hòu】吹匀。将细【xì】胞悬液【yè】按【àn】1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新的含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中。 
 
3)细胞【bāo】冻【dòng】存：待细胞生【shēng】长状态良好时，可进【jìn】行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加入约【yuē】lml含血清的培养基后加入【rù】冻【dòng】存【cún】管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进【jìn】行冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰己挥【huī】发【fā】干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落【luò】、破损及细胞有污【wū】染，请立【lì】即与我们【men】电联。
所【suǒ】有【yǒu】动物【wù】细【xì】胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二【èr】级生物【wù】安全台【tái】内操作，并请注意【yì】防【fáng】护，所【suǒ】有废【fèi】液及接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：食管癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人食管癌细胞(TE-1)运输和【hé】保存：使用含有胎牛血【xuè】清【qīng】的【de】2ml冻存【cún】管发送存活细胞。收到细胞后【hòu】， 可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心【xīn】5min后【hòu】，于洁净操作台【tái】弃去上清，加入推荐使【shǐ】用的培养基后转移至【zhì】l〇cm培养皿或者T75培【péi】养瓶中培养【yǎng】，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。