人涎腺癌细胞（ACC-M）

人涎腺癌细胞(ACC-M)
细胞介绍：
ACC-M细胞是ACC-2细【xì】胞系经体内外不断选择获【huò】得的肺转移【yí】细【xì】胞株【zhū】（ACC-2不形成肺转移），其裸鼠体内肺【fèi】转移【yí】率达96%。该细胞株【zhū】除保留【liú】了上【shàng】皮和【hé】腺【xiàn】源性的特【tè】性外【wài】，体外生长能力大大增强【qiáng】。己证明该细【xì】胞【bāo】株是建立肺高转移性裸鼠模型的【de】极 佳材料。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO，添加 NaHC031.5g八, D-葡萄【táo】糖2.5g八【bā】，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血【xuè】清【qīng】，10%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏【shì】度【dù】，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存【cún】液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞【bāo】悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养基混【hún】合【hé】均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，补【bǔ】加l-2mL培养基后吹匀。然【rán】后将所有【yǒu】细胞【bāo】悬【xuán】液加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或将 细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约【yuē】8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天换【huàn】液并检 查细胞密【mì】度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含【hán】钙、镁【měi】离子【zǐ】的【de】PBS润洗细胞9-21次。力口【kǒu】 2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中【zhōng】消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜下观察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下【xià】培养【yǎng】瓶后加【jiā】少量【liàng】培养基【jī】终止 消化。按6-8ml/瓶补【bǔ】加培养【yǎng】基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养液后【hòu】吹匀。将细【xì】胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的比例分【fèn】到【dào】新的含8ml培养基的新皿中或者【zhě】瓶中。
 
细胞冻存【cún】：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞【bāo】冻存时，弃去培【péi】养基【jī】后加入【rù】少量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落【luò】后【hòu】，加入约【yuē】lml含血清【qīng】的培养基后加入【rù】冻存【cún】管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥【huī】发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶【píng】盖脱落、破【pò】损【sǔn】及细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物【wù】细胞【bāo】均【jun1】视【shì】为有潜在的【de】生物危害性，必须在二【èr】级生物【wù】安全【quán】台内【nèi】操作，并请注【zhù】意防护，所【suǒ】有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃【qì】。
 
细胞特性：
1)来源：人涎腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)运输和【hé】保存：使用含有胎牛【niú】血清的【de】2ml冻存管发【fā】送存活细【xì】胞【bāo】。收到细【xì】胞后，可在1000RPM，常【cháng】温条件下，离心5min后，于洁净【jìng】操作台弃去上清，加【jiā】入推荐使用的培养基后转移至l〇cm培养皿【mǐn】或者T25培养瓶中【zhōng】培养，传代达到【dào】细胞生长状态良好时，再【zài】进行冻存。具体操作【zuò】见细胞培养【yǎng】步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。