人结直肠腺癌细胞（SW-480）

人结直肠腺癌细胞(SW-480)
细胞介绍：
该细胞来源于一个50岁的男性结肠癌患者。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】L-15培养基【jī】(GIBCO)，90%;北美胎牛血清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，100%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
 复苏细胞【bāo】：将含有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅速放【fàng】入37°C水浴【yù】中（水面要低于冻【dòng】存管盖部）摇【yáo】晃【huǎng】解冻【dòng】，移入【rù】事先【xiān】准备【bèi】好的【de】含有4mL培养基【jī】的15ml离心管【guǎn】中混合【hé】均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培 养基后吹匀。然后将所有细胞悬【xuán】液移入【rù】含有5ml培【péi】养基的【de】培养瓶中培养过【guò】夜。 第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养【yǎng】上清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-22次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消化9-22分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观【guān】察细胞【bāo】消化【huà】情【qíng】况，若细胞大【dà】部分变【biàn】圆并【bìng】脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶【píng】后加【jiā】入2ml细胞*培养【yǎng】基终止【zhǐ】消化。轻轻【qīng】吹打后吸出，移入15ml离心管中，在【zài】1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，加入lmL培【péi】养液后吹匀【yún】。移入【rù】到事先准【zhǔn】备好的含有5ml培养基的【de】T-25培【péi】养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中【zhōng】培养。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时，可【kě】进行细胞冻存【cún】。贴壁细胞【bāo】冻存【cún】时【shí】，先要消化处理【lǐ】并进行【háng】细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的9-22步骤进行，后【hòu】的重悬液使用血清【qīng】。加【jiā】DMSO至【zhì】终浓【nóng】度为10%。加入【rù】DMSO后迅速混 匀，按【àn】每lml的数量分【fèn】配到冻存管中。本【běn】公【gōng】司按每个冻【dòng】存【cún】管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后【hòu】，若发【fā】现干冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细【xì】胞有污【wū】染，请立即与我们电联【lián】。
所有动【dòng】物细胞【bāo】均视为有【yǒu】潜在的生物危害【hài】性，必须在二级生【shēng】物安全台内操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有废液【yè】及接触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：结直肠癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结直肠腺癌细胞(SW-480)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确【què】认细胞【bāo】生长状态，去掉【diào】封【fēng】口膜【mó】并【bìng】将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满（80%-90%)请及【jí】时进【jìn】行【háng】细胞传代，传代培【péi】养用6ml本公司附带的*培养基。
5.接到【dào】细【xì】胞次日，请检查细胞是【shì】否污染，若【ruò】发现污染或疑似污染，请及【jí】时与我们取得电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。