人甲状腺鳞癌细胞（SW579）

人甲状腺鳞癌细胞(SW579)
细胞介绍：
在裸鼠中成瘤(产生三级恶性纺锤状巨细胞瘤)。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.L-15培养【yǎng】基(GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。培养条【tiáo】件: 气相【xiàng】：空气，100%。温度：37摄氏度。
2.冻【dòng】存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞【bāo】悬液【yè】的【de】冻存管【guǎn】在37°C水浴中迅速摇【yáo】晃解冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去【qù】上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加【jiā】入【rù】培【péi】养瓶【píng】中培养过夜（或将细胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换【huàn】液【yè】并【bìng】检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-22次。力【lì】口【kǒu】2m丨消【xiāo】化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消化9-22分钟，然后【hòu】在显微镜下观察细胞消【xiāo】化情况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱【tuō】落，迅速拿回【huí】操作台，轻敲【qiāo】几【jǐ】下培养瓶【píng】后加少量培养基【jī】终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻【qīng】轻打匀后【hòu】吸出【chū】，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去【qù】上【shàng】清液，补加l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细【xì】胞悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新【xīn】的【de】含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶【píng】中。
 
细【xì】胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态【tài】良好时【shí】，可进行细【xì】胞冻存。贴【tiē】壁细胞【bāo】冻存时，弃去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含血【xuè】清的【de】培养【yǎng】基后加入冻存管中，再添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细【xì】胞后，若发【fā】现【xiàn】干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱【tuō】落、破损及细胞有污染，请立即与【yǔ】我们电联【lián】。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜【qián】在的生物【wù】危【wēi】害性【xìng】，必须在二级生物【wù】安全【quán】台【tái】内操作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：甲状腺
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人甲状腺鳞癌细胞(SW579)运输和【hé】保存：使用【yòng】含有【yǒu】胎牛血清的2ml冻存【cún】管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心5min后，于洁【jié】净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后【hòu】转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿【mǐn】或者T75培养【yǎng】瓶中培养，传【chuán】代【dài】达到细胞生长状态【tài】良好时，再【zài】进行冻存【cún】。具体操作见【jiàn】细胞【bāo】培【péi】养步骤。
细胞用途：仅供使用。