人非小细胞肺腺癌细胞（Na-H157）

人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：多角，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和【hé】保存：可【kě】选择【zé】干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1)干冰运输【shū】，收到【dào】后立即转入液氮【dàn】冻【dòng】存或直接复苏；（2)存活细胞，收到后【hòu】应继续【xù】生长，传【chuán】代达【dá】到细【xì】胞生长状【zhuàng】态【tài】良好时，再进行冻存【cún】。具体操作见细胞培【péi】养步骤。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备RPIVM-1640培【péi】养基(RPMI-1640:GIBCO,添【tiān】加丙酮酸【suān】钠O.llg八，10mM Hepes)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培【péi】养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳【tàn】，5%。温度【dù】：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液【yè】：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存【cún】。
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管在【zài】37°C水【shuǐ】浴中【zhōng】迅速【sù】摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液，补加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培养过夜（或将
细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基【jī】，培养过夜【yè】）。第二天换液并【bìng】检查细胞密度。细【xì】胞传【chuán】代：如果【guǒ】细胞密度【dù】达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养【yǎng】瓶中，置【zhì】于37°C培养【yǎng】箱中消化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下【xià】观察【chá】细胞消化情况，若细胞大部【bù】分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加【jiā】少量培养基【jī】终止消化。
按【àn】6-8ml/瓶【píng】补加【jiā】培养基，轻轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹匀。
将细【xì】胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例分到新【xīn】的含【hán】8ml培养【yǎng】基的新皿【mǐn】中或者细胞【bāo】冻【dòng】存：待细胞生长状【zhuàng】态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去【qù】培养基【jī】后加入【rù】少量胰酶【méi】，细【xì】胞变圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的培养【yǎng】基后，加入冻存【cún】管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
人非小细胞肺腺癌细胞(Na-H157)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损【sǔn】及【jí】细胞有【yǒu】污染，请立即与我【wǒ】们【men】电联。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为有潜【qián】在【zài】的生物危【wēi】害【hài】性，必须【xū】在二级生物【wù】安全台内操作，并请注意防护，所有废液及【jí】接【jiē】触过【guò】此细胞的器皿需【xū】要灭菌后方能丢弃。