人结肠癌细胞（COLO 205）

人鼻咽癌细胞(CNE2)
细胞介绍：
该CNE2细胞系为低分化鼻咽鳞状细胞癌细胞系。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,90%;胎牛【niú】
血清，10%。
2. 培养条【tiáo】件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现【xiàn】配【pèi】。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有【yǒu】lmL细胞【bāo】悬液的冻【dòng】存【cún】管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合【hé】均【jun1】匀【yún】。在1000RPM条件下【xià】离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去【qù】上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有【yǒu】细胞悬液加入培【péi】养瓶中【zhōng】培养过夜（或【huò】将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中【zhōng】，加【jiā】入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天【tiān】换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含【hán】钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况，若细【xì】胞【bāo】大部 分变圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲几下【xià】培养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】 消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出，在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细【xì】胞悬液【yè】按1: 2到1: 5的【de】比例分到【dào】新【xīn】的【de】含【hán】8ml培养基的新皿中或者【zhě】瓶【píng】中。
细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长【zhǎng】状态【tài】良好【hǎo】时，可进行细胞冻【dòng】存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后【hòu】加入少量【liàng】胰酶，细胞【bāo】变圆脱落后，加入约【yuē】lml含血清的培养基后【hòu】加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进【jìn】行冻存。
 
注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥发干【gàn】净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖脱落、破【pò】损【sǔn】及细胞【bāo】有污【wū】染，请立即与我们电联。
所有动物细【xì】胞【bāo】均视【shì】为有潜在【zài】的生【shēng】物危害性【xìng】，必须在二【èr】级生物安【ān】全台内操作，并【bìng】请【qǐng】注意防【fáng】护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要【yào】灭菌后方能丢弃。
 
人鼻咽癌细胞(CNE2)细胞特性：
1)来源：鼻咽癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用T25瓶充液发送【sòng】活【huó】细胞【bāo】。收到细胞后，请先在显微镜下检【jiǎn】查细胞【bāo】生长状【zhuàng】态，并将T25瓶置于培【péi】养箱约6h或过夜后，再【zài】次检查细【xì】胞状态。若状态【tài】良好，可进行【háng】细胞后【hòu】续【xù】处理操作，按照以下方式进行。若发现可疑污【wū】染【rǎn】物，请及时【shí】与我们取得电联。
细胞用途：仅供使用。