人结肠癌细胞（SW620）

人结肠癌细胞(SW620)
细胞介绍：
SW620是从一个51岁【suì】男性白人【rén】组织中分离得到。由A.Leibovitz等【děng】从【cóng】一个【gè】淋巴结建株。细胞系【xì】主要【yào】由【yóu】无【wú】绒毛的小园球细胞和【hé】双极细胞组成。它仅合成少量【liàng】癌胚【pēi】抗原（CEA)且在裸鼠中有高度的致瘤【liú】性。
 
细胞培养步骤：
一.培养基及培养冻存条件准备：
二【èr】?准备L-15培养基【jī】(GIBCO)，90%;北美胎牛血清，10%。
三?培养条件：气【qì】相【xiàng】：空【kōng】气，100%。温度：37°C，培【péi】养箱湿【shī】度为70%-80%。
1. 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配【pèi】。液【yè】氮【dàn】储存。
2.细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的【de】冻存管迅【xùn】速放入37°C水【shuǐ】浴中（水面要低【dī】于冻存管盖部）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备好【hǎo】的含有4mL培【péi】养【yǎng】基的15ml离心管中【zhōng】混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液【yè】，加入lmL培 养【yǎng】基后吹匀。然后【hòu】将【jiāng】所有细胞悬液移入含有【yǒu】5ml培养基的培养【yǎng】瓶中培养过夜【yè】。第二【èr】天换【huàn】液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结肠癌细胞(SW620)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清【qīng】，用不含钙【gài】、镁离子的【de】PBS润洗细胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察【chá】细胞消化【huà】情况，若细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后【hòu】加入2ml细胞*培养【yǎng】基【jī】终【zhōng】止【zhǐ】消【xiāo】化。轻【qīng】轻吹打后【hòu】吸出，移入15ml离心【xīn】管中，在【zài】1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清【qīng】液【yè】，加入lmL培养【yǎng】液后吹匀。移入到事先准备好的含有5ml培养基的【de】T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培养【yǎng】基的T-75培养瓶【píng】中培养。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时【shí】，先要消【xiāo】化处【chù】理【lǐ】并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的9-21步骤进行， 后的重【chóng】悬液【yè】使用血清。DMSO至终浓度为【wéi】10%。加【jiā】入DMSO后迅速混 匀，按【àn】每lml的数量分配到冻存管中。本【běn】公司按每个冻存【cún】管【guǎn】细胞数目【mù】大于 1X106个细【xì】胞冻【dòng】存【cún】。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖【gài】脱【tuō】落、破损【sǔn】及细胞有污染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级生物安全【quán】台内【nèi】操作，并【bìng】请注意防护，所【suǒ】有废液【yè】及【jí】接触过【guò】此细胞的器皿需要灭菌后方【fāng】能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：结直肠腺癌，来自转移淋巴结
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结肠癌细胞(SW620)细胞接受后的处理：
4.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
5.请先在【zài】显微镜下【xià】确认细【xì】胞生长【zhǎng】状态【tài】，去掉封口膜【mó】并将T25瓶置于37°C培养约【yuē】 2-3h〇
6.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
7.如果细胞长满（80%-90%)请【qǐng】及时进行细胞传代【dài】，传代培养用6ml本公【gōng】司【sī】附带的【de】*培养基【jī】。
8.接到细胞次日，请【qǐng】检查细【xì】胞是【shì】否污染，若发现污染或疑似污【wū】染【rǎn】，请【qǐng】及时与我们取得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。