人结肠腺癌细胞（SW1116）

人结肠腺癌细胞(SW1116)
细胞介绍：
CSAp阴性(CSAp-)。结肠抗原3，阴性。角蛋白【bái】免【miǎn】疫过氧化物酶染色阳性。癌基 因【yīn】c-myc, K-ras, H-ras, myb, sis和【hé】fos的表达【dá】呈阳性。未【wèi】检测到【dào】癌【ái】基因N-myc和N-ras的表达。表达肿【zhǒng】瘤特【tè】异的核基【jī】质蛋白CC-4，CC-5和CC-6。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.L-15培养【yǎng】基(GIBC0)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。培养条件:气【qì】相：空【kōng】气【qì】，100%。温度：37摄氏度。
2.冻存【cún】液【yè】：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液【yè】的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀【yún】。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所【suǒ】有细胞悬液加入培养瓶中培养【yǎng】过夜（或【huò】将细胞【bāo】悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天换【huàn】液并【bìng】检查细胞密【mì】度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人结肠腺癌细胞(SW1116)对于贴壁细胞，传代可【kě】参【cān】考以下方法【fǎ】：弃去培养上清【qīng】，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消【xiāo】化（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然后在【zài】显微镜下观察【chá】细胞消化情【qíng】况【kuàng】，若细胞大【dà】部分【fèn】变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台，轻【qīng】敲几下培【péi】养瓶后加少量培养基【jī】终【zhōng】止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时【shí】，可进【jìn】行细胞冻存。贴壁【bì】细【xì】胞冻存时，弃去培养基【jī】后加入【rù】少【shǎo】量胰酶，细胞变圆脱落【luò】后【hòu】，加入约lml含血清的【de】培【péi】养基后加入冻存管中，再【zài】添【tiān】加1〇%DMSO后进行冻存。
  
注意事项：
收到【dào】细胞后【hòu】，若发现【xiàn】干冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细胞有污【wū】染，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞均视为有潜在【zài】的【de】生物【wù】危害性，必须在二【èr】级生物安全台内操作，并【bìng】请注意防护【hù】，所有废液【yè】及接【jiē】触【chù】过此细胞的【de】器皿需要灭菌后方能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：结肠腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人结肠腺癌细胞(SW1116)运输和保【bǎo】存【cún】：使【shǐ】用含有【yǒu】胎牛血清的【de】2ml冻【dòng】存管发【fā】送存活细胞。收到细胞后， 可在1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁净【jìng】操作【zuò】台弃去上清，加入推荐 使用的培【péi】养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或者T75培养瓶中培【péi】养【yǎng】，传代【dài】达到细【xì】胞生长 状态良【liáng】好时【shí】，再进行冻存。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。